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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 肝细胞培养问题！
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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1989zb

管理员

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

[求助] 肝细胞培养问题！ 已有2人参与

有没有人知道，做肝细胞，怎么除去里面的脂肪呢？？刚分离出来的肝细胞，还很多，第二天就很少了 还不怎么贴壁，这是什么原因呢
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1楼 2014-02-25 09:38:54
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1989zb

专家顾问

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
12楼: Originally posted by ifyousee at 2014-03-03 21:52:55
一般是类纤维状...

我培养的是鸭胚肝细胞  你培养过吗〉〉？？有些想纤维状  后面分离出来培养类圆形  是不是前面两张的纤维状的不是呢？？我看有的文章里面说鸭胚肝细胞会生长，几天后变成梭状……
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13楼2014-03-04 10:20:04
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ifyousee

主管区长

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
1989zb: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-02-25 16:52:19
我长期从事鱼类各种组织细胞的原代培养。大黄鱼、欧洲鳗鲡、日本鳗鲡、眼斑拟石首鱼的肝脏都是有培养过的。最终也能成功建细胞系。肝细胞原代培养的确看起来非常脏
首先很重要的是你们用的是什么动物的肝脏。其次培养基、培养温度、CO2、培养条件等等的。
关于肝脏培养的方法有很多，我最喜欢用的有两种：组织块干贴和胰酶消化组织块悬液两种办法，各有优缺点吧。
培养肝细胞里面飘着的“脂肪”状的杂质的确很多，但是根据我原代培养的经验其实这些杂质是没有影响的。
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2楼2014-02-25 12:26:09
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1989zb

兑换贵宾

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
2楼: Originally posted by ifyousee at 2014-02-25 12:26:09
我长期从事鱼类各种组织细胞的原代培养。大黄鱼、欧洲鳗鲡、日本鳗鲡、眼斑拟石首鱼的肝脏都是有培养过的。最终也能成功建细胞系。肝细胞原代培养的确看起来非常脏
首先很重要的是你们用的是什么动物的肝脏。其次培 ...

嗯 我培养的是鸭胚肝细胞，就是刚分离出来的肝细胞在细胞瓶里面 看着很浑浊，，还想着怎么去除那类似脂肪的东西  刚分离出来细胞瓶里面还是很多，过了几个小时在看，就很少了  
请教哈你用胰酶消化胰酶的浓度以及消化时间是多少呢？？
可以把你的方法给我一份吗？
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3楼2014-02-25 16:52:08
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ifyousee

版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
3楼: Originally posted by 1989zb at 2014-02-25 16:52:08
嗯 我培养的是鸭胚肝细胞，就是刚分离出来的肝细胞在细胞瓶里面 看着很浑浊，，还想着怎么去除那类似脂肪的东西  刚分离出来细胞瓶里面还是很多，过了几个小时在看，就很少了  
请教哈你用胰酶消化胰酶的浓度以及 ...

胰酶消化装到15mL离心管或是2mL EP管中，过个5分钟晃动一下，成乳糜状就可以了，觉得杂质多100目的筛绢过滤一下。飘在上面的脂肪15mL离心管1000rpm离个5min密度较轻的那一层基本是飘在上面的。但是也别指望去太干净。另外脂肪我觉得是真没有影响。
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4楼2014-02-27 10:02:31
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