| 查看: 1206 | 回复: 1 | |||
AFM木虫 (正式写手)
|
[交流]
求助 噬菌体培养不出来，怎么办？谢谢 已有1人参与
|
|
各位战友，最近作一些噬菌体方面的实验，按照《分子克隆》里的实验方法进行操作，可是没有噬斑出现（液体也没变澄清），请战友看看是不是哪一步有问题，具体试验步骤如下： 一 固体培养基法（测噬菌体的浓度） 取100μL的耻垢分支杆菌（109cfu/mL）与100μL不同稀释度的噬菌体混匀，于37℃温育15-20min，然后加入3mL 50℃的软琼脂培养基，混匀后倒上层平板，37℃培养，三天后没有噬菌斑出现。 二液体培养法 取100μL的耻垢（109cfu/mL）与100μL不同稀释度的噬菌体混匀，于37℃温育15-20min，然后加入10mL的液体培养基，37℃振摇培养，两天后液体也没有变澄清。 三 提取噬菌体DNA 按照《分子克隆》的方法进行操作，其中有一步是1010宿主菌与噬菌体（107-108）混匀后，加入500mL新鲜培养基，剧烈振摇（条件所限，我采用200rpm），8-12h后可观察到液体变澄清，可是培养15h后液体依然浑浊，而且加入氯仿后也没有变澄清？ 到底是哪里出现问题了，另外问一下耻垢分支杆菌生长至对数期和稳定期各需要多长时间啊！谢谢各位了！ |
回复此楼» 猜你喜欢
309求调剂
已经有9人回复
-
环境科学与工程334分求调剂
已经有4人回复
-
085404求调剂，总分309，本科经历较为丰富
已经有6人回复
-
285求调剂
已经有5人回复
-
求化学调剂
已经有7人回复
-
材料工程专硕求调剂
已经有4人回复
-
317求调剂
已经有10人回复
-
318求调剂
已经有4人回复
-
化学308分调剂
已经有3人回复
-
一志愿河北工业大学0817化工278分求调剂
已经有18人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助：培养的Cos7 cell 不知道是不是污染，谢谢大侠！！
已经有4人回复
- 请问联合培养能拿到国外大学的博士文凭吗?求助各位虫友，谢谢大家了！
已经有10人回复
- 【求助】有谁知道中科院跟深圳大学联合培养的工程硕士怎么样？谢谢
已经有10人回复
- 【求助/交流】单菌落过夜摇菌为什么摇不出来呀？急求
已经有33人回复
- 【求助/交流】噬菌体肽库淘选时滴度测定问题
已经有7人回复
- 【求助/交流】噬菌体展示肽库淘选
已经有15人回复
- 【求助/交流】着急呀，噬菌体污染，更换菌株
已经有17人回复
- 【求助/交流】关于噬菌体蓝白斑的问题
已经有3人回复
- 【求助】公派联合培养期未满，外方导师变动工作，去中国一所高校当院长，我怎么办？
已经有10人回复
- 【求助/交流】哪位同仁做过噬菌体肽库或者抗体库淘筛的，请一定要进来呀~~~~
已经有14人回复
- 【求助/交流】不加碳源的无机盐培养基为什么会长很多菌？有培养基配方，小弟先谢谢了
已经有16人回复
- 【求助/交流】基因工程大肠杆菌染噬菌体问题求助
已经有3人回复
- 【求助/交流】噬菌体DNA提取，电泳结果显示不止一条带，等待高手指点
已经有7人回复
- 【求助】培养不出来晶体，请大家看看是怎么回事？
已经有7人回复
weng1988
铜虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 173.4
- 散金: 50
- 帖子: 208
- 在线: 16.1小时
- 虫号: 1171207
- 注册: 2010-12-16
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
2楼2011-03-24 21:14:44
