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从未遇见的TA克隆中酶切位点丢失
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最近在做关于融合PCR的实验。 先分别扩增A片段和B片段，在A片段左端加了PstI酶切位点，在B片段右端也加了PstI酶切位点，然后通过融合PCR将A和B连接起来。（由于这两个片段很不好扩增，故采用2*Taq扩增，一般而言，做融合PCR都不会用Taq酶切来扩增的） 融合后连T载体测序，与原序列比对发现A和B确实已经融合上，但是AB片段两端的酶切位点却没有了，不知道是什么原因，跪求大神指教，谢谢。 |
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