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飘凝alice

木虫 (正式写手)

[求助] 皮肤细胞培养方法 已有1人参与

求 推荐好的皮肤细胞模型和培养方法
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treetreew

木虫 (小有名气)

表皮还是真皮?
你要干啥?
3楼2014-02-19 13:40:10
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yipan

铜虫 (职业作家)


【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
飘凝alice: 金币+5 2014-02-20 14:24:36
人皮肤成纤维细胞经分离得到后,在体外容易培养,培养基为DMEM(Dulbecco MEM)+10%NBS(小牛血清)或者RPMI-1640+10%NBS(小牛血清),培养方法主要有两种:静态培养和动态培养[10]。静态培养,即在培养时培养液静止不动,这种方法操作简单,不易染菌。但由于营养液不动,细胞从营养液中摄取营养或向外排出代谢产物都不很充分,细胞气体交换要通过培养液厚层,这些不利于细胞的生长。而动态培养是一种悬浮培养状态,细胞混合均匀,营养利用充分,利于细胞的生长。以往人们常用方瓶静态培养人皮肤成纤维细胞,但人皮肤成纤维细胞是一种贴壁细胞,在方瓶中培养时受到表面积限制,获得的细胞产量低,一般不能满足组织工程皮肤的大量需要。当细胞生长融合率达90﹪以上时,倒掉瓶内旧培养液,用PBS(pH 7.2~7.4)洗三次,加入1ml的0.25﹪胰蛋白酶溶液,消化1~3min后把培养瓶放置在倒置显微镜下进行观察,发现细胞回缩、细胞间隙增大后,加含10﹪NBS的RPMI-1640或DMEM培养液终止消化。用弯头吸管轻轻吹打,使细胞脱离瓶壁后形成细胞悬液,计数,以 1:3的比例接种至 100ml培养瓶中[11],待细胞生长融合率达90﹪以上,进行下一次传代。
2楼2014-02-19 13:35:17
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飘凝alice

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by treetreew at 2014-02-19 13:40:10
表皮还是真皮?
你要干啥?

老板让我做皮肤细胞烧烫伤实验,然后基于此,做下一步分析。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
把握手中的就是无限,永恒也就消融于一个时辰
4楼2014-02-19 17:12:14
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吴迪2011

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 飘凝alice at 2014-02-19 17:12:14
老板让我做皮肤细胞烧烫伤实验,然后基于此,做下一步分析。
...

楼主你还在做这方面的研究吗?我想了解你是怎么做烧烫伤皮肤细胞模型的,谢谢。
6楼2014-10-17 15:22:58
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