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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 皮肤细胞培养方法
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飘凝alice

木虫 (正式写手)

[求助] 皮肤细胞培养方法 已有1人参与

求 推荐好的皮肤细胞模型和培养方法
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把握手中的就是无限，永恒也就消融于一个时辰
1楼 2014-02-18 20:07:30
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yipan

铜虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
飘凝alice: 金币+5 2014-02-20 14:24:36
人皮肤成纤维细胞经分离得到后，在体外容易培养，培养基为DMEM(Dulbecco MEM)+10%NBS(小牛血清)或者RPMI-1640+10%NBS(小牛血清)，培养方法主要有两种：静态培养和动态培养[10]。静态培养，即在培养时培养液静止不动，这种方法操作简单，不易染菌。但由于营养液不动，细胞从营养液中摄取营养或向外排出代谢产物都不很充分，细胞气体交换要通过培养液厚层，这些不利于细胞的生长。而动态培养是一种悬浮培养状态，细胞混合均匀，营养利用充分，利于细胞的生长。以往人们常用方瓶静态培养人皮肤成纤维细胞，但人皮肤成纤维细胞是一种贴壁细胞，在方瓶中培养时受到表面积限制，获得的细胞产量低，一般不能满足组织工程皮肤的大量需要。当细胞生长融合率达90﹪以上时，倒掉瓶内旧培养液，用PBS（pH 7.2～7.4）洗三次，加入1ml的0.25﹪胰蛋白酶溶液，消化1～3min后把培养瓶放置在倒置显微镜下进行观察，发现细胞回缩、细胞间隙增大后，加含10﹪NBS的RPMI-1640或DMEM培养液终止消化。用弯头吸管轻轻吹打，使细胞脱离瓶壁后形成细胞悬液，计数，以 1:3的比例接种至 100ml培养瓶中[11]，待细胞生长融合率达90﹪以上，进行下一次传代。
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2楼2014-02-19 13:35:17
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treetreew

木虫 (小有名气)
表皮还是真皮？
你要干啥？
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3楼2014-02-19 13:40:10
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飘凝alice

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by treetreew at 2014-02-19 13:40:10
表皮还是真皮？
你要干啥？

老板让我做皮肤细胞烧烫伤实验，然后基于此，做下一步分析。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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把握手中的就是无限，永恒也就消融于一个时辰
4楼2014-02-19 17:12:14
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liuyuzheng

新虫 (初入文坛)
内容已删除
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5楼2014-10-15 21:53:59
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吴迪2011

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 飘凝alice at 2014-02-19 17:12:14
老板让我做皮肤细胞烧烫伤实验，然后基于此，做下一步分析。
...

楼主你还在做这方面的研究吗？我想了解你是怎么做烧烫伤皮肤细胞模型的，谢谢。
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6楼2014-10-17 15:22:58
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sun22741592

金虫 (小有名气)
你要养哪种细胞呢？keratinocyte ，melanocyte还是froblast ？
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7楼2014-11-07 12:40:20
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