24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1401  |  回复: 10

善其身

新虫 (初入文坛)

[求助] 破碎米曲霉得胞内酶 已有2人参与

实验筛选到了一株降解特异底物的米曲霉,并且通过实验已经证明了产生催化作用的酶为胞内酶。想继续往酶的水平上进行研究,用超声破碎仪进行破碎,但破碎后却没有测到酶活,变幅杆、功率、冰浴等,应该考虑的问题都考虑了,反复实验多次也是相同结果。看了小木虫上的其他帖子,找不到原因所在,瓶颈啊!超声破碎的方法对于米曲霉到底可不可行?若可行,问题何在?若此不可行,那用什么方法可行?把全部金币都拿出来了,求大神指点!众人拾柴火焰高,大家多交流交流。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bigboy2050

铜虫 (小有名气)

工业上用高压均质机,你可以加点溶菌酶再超声,或者反复冻融。
职业无分贵贱,做事要有格调
2楼2014-02-17 16:41:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

善其身

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by bigboy2050 at 2014-02-17 16:41:46
工业上用高压均质机,你可以加点溶菌酶再超声,或者反复冻融。

很多文章单用超声就可以了,你的意思是我没能实现破碎的目的?(还有个小问题,液体培养后形成了菌丝球,但后面超声破碎要重悬,怎样处理简便可行)
3楼2014-02-18 15:18:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bigboy2050

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by 善其身 at 2014-02-18 15:18:23
很多文章单用超声就可以了,你的意思是我没能实现破碎的目的?(还有个小问题,液体培养后形成了菌丝球,但后面超声破碎要重悬,怎样处理简便可行)...

建议先用高压均质机试一下,联系设备厂家一般乐意让试(一般至少1L料液),至于超声不能检测到酶活的原因再慢慢分析,这样可能可以节省你的时间。
职业无分贵贱,做事要有格调
4楼2014-02-20 08:54:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飘雪3889

木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 善其身 at 2014-02-18 15:18:23
很多文章单用超声就可以了,你的意思是我没能实现破碎的目的?(还有个小问题,液体培养后形成了菌丝球,但后面超声破碎要重悬,怎样处理简便可行)...

我是用涡旋重悬或者磁力搅拌器搅拌重悬的
5楼2014-02-24 12:44:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

善其身

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 飘雪3889 at 2014-02-24 12:44:11
我是用涡旋重悬或者磁力搅拌器搅拌重悬的...

嗯,谢谢,这个我也是这样做的,但就是超声破碎过后始终检测不到酶活,能否指点一二啊?!
6楼2014-02-26 10:06:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飘雪3889

木虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 善其身 at 2014-02-26 10:06:39
嗯,谢谢,这个我也是这样做的,但就是超声破碎过后始终检测不到酶活,能否指点一二啊?!...

你测酶活的条件是不是成熟的?看你的描述,似乎是前期的实验证实整体细胞有催化能力,想往酶上面更进一步。我之前怎么都测不出来,后来发现是测酶活条件不大对。
7楼2014-02-26 16:33:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

善其身

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 飘雪3889 at 2014-02-26 16:33:01
你测酶活的条件是不是成熟的?看你的描述,似乎是前期的实验证实整体细胞有催化能力,想往酶上面更进一步。我之前怎么都测不出来,后来发现是测酶活条件不大对。...

简单的说,就是把酶液和底物溶液混合,30℃恒温震荡,测底物残留量,会不会是我用的缓冲液有问题?能不能加一下你的QQ,请教请教
8楼2014-02-26 20:28:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飘雪3889

木虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 善其身 at 2014-02-26 20:28:23
简单的说,就是把酶液和底物溶液混合,30℃恒温震荡,测底物残留量,会不会是我用的缓冲液有问题?能不能加一下你的QQ,请教请教...

你看看缓冲液的ph、反应时间有木有问题。QQ就不用了,我也是刚上路的菜鸟,嘿嘿
9楼2014-02-27 14:26:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蓝心草

铜虫 (小有名气)

请问你这个米曲霉超声做好了么?我过两天也要做,请指教一下
为美好努力
10楼2014-03-03 10:19:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 善其身 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 300求调剂 +7 橙a777 2026-04-15 7/350 2026-04-15 22:28 by Equinoxhua
[考研] 材料相关专业344求调剂双非工科学校或课题组 +21 hualkop 2026-04-12 23/1150 2026-04-15 22:02 by hualkop
[考研] 291求调剂 +6 关忆北. 2026-04-14 6/300 2026-04-15 21:32 by 笑春风☆
[考研] 307中医考研调剂 +4 于以采蘩 2026-04-14 4/200 2026-04-15 19:14 by AN流800
[考博] 26年电池方向博士申请 10+3 15615939259 2026-04-09 4/200 2026-04-15 14:22 by kwansei
[考研] 085801电气专硕272求调剂 +19 电气李 2026-04-13 21/1050 2026-04-15 13:37 by 黑科技矿业
[考研] 310求调剂 +16 666真好 2026-04-11 18/900 2026-04-15 13:28 by 黑科技矿业
[基金申请] RY:中国产出的科学垃圾论文,绝对数量和比例都世界第一 +6 zju2000 2026-04-14 17/850 2026-04-14 14:34 by jurkat.1640
[考研] 求调剂 +16 雪逢冬 2026-04-10 16/800 2026-04-14 14:27 by 逆水乘风
[考研] 085600材料与化工349分求调剂 +16 李木子啊哈哈 2026-04-12 17/850 2026-04-14 09:11 by fenglj492
[考研] 一志愿华南理工大学331分材料求调剂 +10 天下ww 2026-04-09 11/550 2026-04-13 23:25 by pies112
[考研] 302求调剂 +10 易!? 2026-04-13 10/500 2026-04-13 19:04 by lbsjt
[考研] 一志愿西北工业大学289 085602 +33 yang婷 2026-04-10 34/1700 2026-04-12 08:11 by Art1977
[考研] 材料与化工300求调剂 +39 肖开文 2026-04-09 43/2150 2026-04-12 01:30 by 秋豆菜芽
[考研] 280求调剂 +13 wzzz王 2026-04-09 13/650 2026-04-12 00:31 by 勇攀高峰0126
[考研] 调剂 +10 只叙离别辞 2026-04-09 12/600 2026-04-11 20:57 by 逆水乘风
[考研] 086003调剂求助 +21 苏弋万 2026-04-09 22/1100 2026-04-11 20:25 by dongdian1
[考研] 0859,337求调剂 +4 研s. 2026-04-10 4/200 2026-04-11 11:34 by caotw2020
[考研] 314求调剂 +14 weltZeng 2026-04-09 14/700 2026-04-09 23:14 by wolf97
[考研] 材料专硕(0856) 339分求调剂 +9 哈哈哈鹅哈哈哈 2026-04-09 10/500 2026-04-09 20:01 by Orcid
信息提示
请填处理意见