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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 关于凝胶成像拍照后引出的一些问题
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Shull

铜虫 (初入文坛)

[求助] 关于凝胶成像拍照后引出的一些问题 已有3人参与

针对昆虫进行病毒检测

我的操作：上下两泳道分别是5000和10000的Marker
电泳条件：80V+1小时
以前没跑过，没经验，跑出来效果一般。请各位大神指教：
问题：1.拍出来的照片为什么marker上有红色标记？机器还是软件设置的问题？在别的成像机器上不会有。
          2.第七道上的亮带为什么糊开了？是不是DNA开始有点降解了，还是跑胶的时间太长了？
          3.上面的第一泳道的marker 为什么会拖尾？是不是设置的电压太高了导致电流太大了而形成 的？
          4.这样一整块胶  我把它分成两段分别来跑 是不是没单独跑或并行跑效果好？
          5.亮带比较暗的原因是什么？ 是处理时间长了，还是病毒浓度比较低，扩出来的量不够多？
[img]http://[wmv][wmv][wmv][swf][img][/img][/swf][/wmv][/wmv][/wmv][/img]
关于凝胶成像拍照后引出的一些问题
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来自星星的我
1楼 2014-02-17 15:38:51
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119904386

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-02-18 11:47:38
Shull: 金币+4, ★★★很有帮助 2014-02-20 14:09:07
1、红色标记应该是软件自动显示的
2、第七道上的亮带为什么糊开了？  泡太久 跑太远都可能
3、上面的第一泳道的marker 为什么会拖尾？  可能胶不均匀 也可能量太大 电压高
4、一样的
5、亮带比较暗的原因是什么？   可能扩增体系需优化 也可能确实是模板的量太少
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2014-02-17 17:00:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-02-18 11:47:45
这个是PCR扩增的结果么？然后请放一张只有电泳凝胶的图，并在图上标记好marker的大小，说一下你的目的基因的大小
赞一下 回复此楼
植根于内心的修养；无需提醒的自觉；以约束为前提的自由；为别人着想的善良
3楼2014-02-17 18:39:10
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-02-18 11:47:50
1、红色显示曝光过度，有的软件不会显示红色。
2、小分子量DNA容易扩散，胶静置时间长。
3、marker拖尾可能是电流太大，看你的电压也不算高。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2014-02-18 10:02:45
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