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我是传奇456金虫 (正式写手)
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[求助]
国外邮寄回来的突变型拟南芥的种子长不出来，求助！ 已有2人参与
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用MS固体培养基培育（灭菌前调ph至5.8），种子消毒后加入培养基中，封口，4℃春化3天，然后培养条件为温度 23℃/18℃，光/暗周期 16/8h。 结果同样条件下的野生型拟南芥发芽率约80%，而此突变型拟南芥发芽率为0。 难道是国外邮寄的过程中有什么措施使得拟南芥种子失活了？ 特来求助！  |
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chiden
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【答案】应助回帖
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我是传奇456: 金币+10, ★★★很有帮助, THX~~~ 2014-02-09 15:21:33
amisking: MolEPI+1, 鼓励发帖交流！ 2014-02-09 18:09:54
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首先， 如果是陈年的种子确实有很大可能发芽率本身就很低，你用野生型发芽率做对照，那么这个是同一时间收获的种子么。 其次就是你这个突变型拟南芥是否本身对出芽就有影响？你也没有具体提到这个。 第三，消毒是怎样消毒的？拟南芥的种子消毒有很多种方式，不同时间收获的种子，或者-20°保存过的种子在发芽的时候我们会采用不一样的消毒方式，这个跟个人的经验也有一定的关系，但是无论哪种一般而言差别并不的很大。 第四，4°春化的时间你可以再缩短一点，两天也可以，这个仅供参考你试试 第五，将培养间改为1/2 MS培养间呢，注意在萌发的过程中不要使得培养间水汽过重，尽量保持无明显水滴，不要太湿也是有影响的 以上是我播种拟南芥时的一些经验，希望对你有帮助吧 |
3楼2014-02-09 14:06:12
lvbobo823
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2楼2014-02-09 09:20:52
chiden
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4楼2014-02-09 14:08:30
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5楼2014-02-09 15:42:51
chiden
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建议： 1. 培养基播种：消毒方式改为75%酒精洗涤8min，在洗涤过程中置于37°摇床，转速约180rpm，取出后dd水洗3次~5次（超净工作台内操作）。将种子用枪头（灭菌消毒的剪掉部分尖端的枪头）点在培养基上，务必将种子带进去的水在超净工作台内吹干后封口。之后4°春化处理。 2. 一般不建议先春化再播种，春化后的种子在消毒的过程更容易失活。 3. 土壤播种可以尝试，但并不一定就说发芽率会更高。取约20-30颗足以。土壤要求不能过于干燥，但也不能水过量，自己看着办；加入的蛭石最好用小块是蛭石。像有的实验室中玉米用的蛭石，对于拟南芥而言就有些过了。 |
6楼2014-02-09 15:58:20
