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liulugang

木虫 (小有名气)

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[求助] 3700bp大片段PCR的问题。。。急已有14人参与

如题，3700bp的片段做PCR，一直无法正确P出，请问选择什么酶和相应体系可以p出这种大片段。。。望解答。。谢谢啦

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1楼 2014-01-19 14:42:58

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冰封之real

银虫 (初入文坛)

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【答案】应助回帖

3700的片段不算短，但也不是特别长，根据我的经验普通taq，extaq,lataq都可以，如果你需要序列准确的话可以考虑后两种（个人推荐extaq），phusion也可以但是这酶对条件要求比较严格。另外，P不出来不一定是酶的问题，退火温度、延伸时间不合适都有可能P不出来，前者可以做touchdown解决，后者一般按1k 1min的速度计算一般不会出问题。