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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 大肠杆菌作为宿主菌间的差别
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bingdong05

银虫 (正式写手)

[求助] 大肠杆菌作为宿主菌间的差别 已有1人参与

最近要构建一个质粒，转化DH5a，但是一直得不到转化子，怀疑是质粒太大所致(质粒20多kb)，查相关的资料也没有查到，还望知道的虫友指教下哈(常用宿主菌的作用，表达or克隆，可以容纳的质粒大小的上限等），谢谢!
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1楼 2014-01-17 18:11:13
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研究室新生

铜虫 (小有名气)
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-01-26 06:17:29
我最近也出现了这个问题。。。怀疑是质粒太大的原因~~曾经做出来过一次，但是酶切验证的时候又出了问题，据说有一个invitrogen公司的DH10B~~~我问过，是专门吸收大质粒的感受态细胞，在考虑以后可以试试~~
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人生是一棵不停生长的树。
2楼2014-01-21 09:22:53
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研究室新生

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-01-21 09:27:26
bingdong05: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-01-22 09:29:19
我最近也遇到这样的问题，怀疑是质粒过大，感受态细胞不能有效吸收质粒导致的，后来好不容易有一次做了出来，酶切验证又出现了问题~~听说invitrogen有一个DH10B感受态细胞，是专门吸收大质粒的，我电话问过，在考虑以后可以试试~~
赞一下(1人) 回复此楼
人生是一棵不停生长的树。
3楼2014-01-21 09:25:07
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