应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » western主带附近有很细的条带
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 849  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

weizhi111

超级版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

[求助] western主带附近有很细的条带 已有3人参与

目的蛋白是第一张图，这次两张膜上都出现主带附近有一些比较细的条带，同样的样品和抗体前几天刚做过一轮，效果还挺好，只是上样量没太调好，所以这次重新做了。内参actin还正常，目的蛋白条带不好啊，求大神帮助！
western主带附近有很细的条带
BRM 1-16-1.jpg


western主带附近有很细的条带-1
ACTIN1 1-16.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2014-01-17 07:39:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weizhi111

兑换贵宾

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
2楼: Originally posted by wukaixz at 2014-01-17 09:01:06
1.抗体是不是回收重复利用的？重复利用的抗体效价会降低。
2.样品是不是放的时间长了？蛋白有些降解，建议重新取样。若不是，可以用以前的样品做个阳性对照。看是否也是这样。
3.杂一抗前用5%的脱脂奶粉封闭30min ...

谢谢，抗体确实是回收用的（第二次），样品放的时间也不太长，前几天刚做过一轮，效果还不错。（希望不是降解，要不然重提就比较麻烦，还要重取样）。我确实是用5%脱脂奶封闭的，并且封闭了1.5小时，上次也是这么做的。
赞一下 回复此楼
4楼2014-01-17 14:23:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

wukaixz

专家顾问

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
weizhi111: 金币+5 2014-01-18 08:48:40
1.抗体是不是回收重复利用的？重复利用的抗体效价会降低。
2.样品是不是放的时间长了？蛋白有些降解，建议重新取样。若不是，可以用以前的样品做个阳性对照。看是否也是这样。
3.杂一抗前用5%的脱脂奶粉封闭30min,可以降低背景和杂带。
原因很多的，问一问你师兄师姐。

祝实验顺利！
赞一下 回复此楼
2楼2014-01-17 09:01:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

daibingling

管理员

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
封闭的不彻底，导致杂条带很多。
赞一下 回复此楼
3楼2014-01-17 11:28:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wolfman840

实习版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果抗体没有问题，且已经封闭了的话，那最有可能就是蛋白降解了。你再提一次试试，蛋白保存在什么条件下的也要追溯一下。
赞一下 回复此楼
5楼2014-01-17 15:10:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿：西北大学，英一数一408-284分求调剂 +7 12.27 2026-03-27 7/350 2026-03-31 21:59 by lbsjt
[考研] 一志愿北京科技大学085601材料工程英一数二初试总分335求调剂 +4 双马尾痞老板2 2026-03-31 4/200 2026-03-31 21:08 by Wang200018
[考研] 本2一志愿C9-333分，材料科学与工程，求调剂 +9 升升不降 2026-03-31 9/450 2026-03-31 18:01 by 无际的草原
[考研] 317求调剂 +12 蛋黄咸肉粽 2026-03-26 13/650 2026-03-31 16:44 by asdfzly
[考研] 一志愿武汉理工，总分321，英一数二，求老师收留。 +12 nnnnnnn5 2026-03-25 12/600 2026-03-31 16:21 by 记事本2026
[考研] 286求调剂 +6 Faune 2026-03-30 6/300 2026-03-31 14:37 by jp9609
[考研] 生物学 296 求调剂 +7 朵朵- 2026-03-26 9/450 2026-03-31 14:26 by jp9609
[考研] 262求调剂 +7 ZZ..000 2026-03-30 8/400 2026-03-31 10:05 by cal0306
[考研] 297 地理学070500 复试求调剂 +3 小圆圈圈ooo 2026-03-30 3/150 2026-03-30 21:05 by 余震yz
[考研] 332求调剂 +14 032500 2026-03-25 14/700 2026-03-30 20:03 by 无际的草原
[考研] 085601材料工程找调剂 +17 oatmealR 2026-03-29 18/900 2026-03-30 19:21 by Wang200018
[考研] 0703 化学 求调剂，一志愿山东大学 342 分 +7 Shern—- 2026-03-28 7/350 2026-03-30 16:31 by nothing投稿中
[考研] 332求调剂 +6 Lyy930824@ 2026-03-29 6/300 2026-03-30 10:53 by 1172367218
[考研] 343求调剂085601 +3 要努力学习x 2026-03-29 3/150 2026-03-29 18:35 by wxiongid
[考研] 调剂考研 +3 王杰一 2026-03-29 3/150 2026-03-29 08:09 by fmesaito
[考研] 283求调剂 +7 A child 2026-03-28 7/350 2026-03-28 12:05 by zllcz
[考研] 一志愿南京航空航天大学材料学硕求调剂 +3 @taotao 2026-03-28 3/150 2026-03-28 10:26 by JourneyLucky
[考研] 285求调剂 +4 AZMK 2026-03-27 7/350 2026-03-27 20:59 by AZMK
[考研] 调剂 +3 李嘉图·S·路 2026-03-27 3/150 2026-03-27 11:19 by wangjy2002
[考研] 中国科学院深圳先进技术研究院-光纤传感课题组招生-中国科学院大学、深圳理工大学联培 +5 YangTyu1 2026-03-26 5/250 2026-03-26 18:27 by 猫咪猫咪呀
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭