应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » western主带附近有很细的条带
51/1返回列表
查看: 819  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

weizhi111

至尊木虫 (正式写手)

[求助] western主带附近有很细的条带 已有3人参与

目的蛋白是第一张图，这次两张膜上都出现主带附近有一些比较细的条带，同样的样品和抗体前几天刚做过一轮，效果还挺好，只是上样量没太调好，所以这次重新做了。内参actin还正常，目的蛋白条带不好啊，求大神帮助！
western主带附近有很细的条带
BRM 1-16-1.jpg


western主带附近有很细的条带-1
ACTIN1 1-16.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2014-01-17 07:39:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

daibingling

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
封闭的不彻底，导致杂条带很多。
赞一下 回复此楼
3楼2014-01-17 11:28:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

wukaixz

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
weizhi111: 金币+5 2014-01-18 08:48:40
1.抗体是不是回收重复利用的？重复利用的抗体效价会降低。
2.样品是不是放的时间长了？蛋白有些降解，建议重新取样。若不是，可以用以前的样品做个阳性对照。看是否也是这样。
3.杂一抗前用5%的脱脂奶粉封闭30min,可以降低背景和杂带。
原因很多的，问一问你师兄师姐。

祝实验顺利！
赞一下 回复此楼
2楼2014-01-17 09:01:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weizhi111

至尊木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wukaixz at 2014-01-17 09:01:06
1.抗体是不是回收重复利用的？重复利用的抗体效价会降低。
2.样品是不是放的时间长了？蛋白有些降解，建议重新取样。若不是，可以用以前的样品做个阳性对照。看是否也是这样。
3.杂一抗前用5%的脱脂奶粉封闭30min ...

谢谢，抗体确实是回收用的（第二次），样品放的时间也不太长，前几天刚做过一轮，效果还不错。（希望不是降解，要不然重提就比较麻烦，还要重取样）。我确实是用5%脱脂奶封闭的，并且封闭了1.5小时，上次也是这么做的。
赞一下 回复此楼
4楼2014-01-17 14:23:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wolfman840

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果抗体没有问题，且已经封闭了的话，那最有可能就是蛋白降解了。你再提一次试试，蛋白保存在什么条件下的也要追溯一下。
赞一下 回复此楼
5楼2014-01-17 15:10:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 289求调剂 +3 BrightLL 2026-03-02 4/200 2026-03-02 21:17 by BrightLL
[考研] 理学，工学，农学调剂，少走弯路，这里欢迎您！ +5 likeihood 2026-03-02 8/400 2026-03-02 20:39 by ji493940045
[考研] 中国科学技术大学材料与化工281求调剂，有科研和获奖经历 +5 wsxw 2026-03-02 5/250 2026-03-02 20:12 by hypershenger
[考研] 课题组接收材料类调剂研究生 +4 gaoxiaoniuma 2026-02-28 5/250 2026-03-02 19:33 by Xinyuu
[考研] 求调剂 +10 yunziaaaaa 2026-03-01 11/550 2026-03-02 19:17 by caszguilin
[考研] 材料085601调剂 +5 多多子. 2026-03-02 5/250 2026-03-02 19:15 by zhukairuo
[考研] 268求调剂 +3 好运连绵不绝 2026-03-02 3/150 2026-03-02 19:05 by zhukairuo
[考研] 材料调剂 +3 恒顺自然 2026-03-02 3/150 2026-03-02 18:49 by L135790
[考研] 284求调剂 +5 天下熯 2026-03-02 5/250 2026-03-02 18:38 by caszguilin
[考研] 290求调剂 +6 ErMiao1020 2026-03-02 6/300 2026-03-02 18:14 by lature00
[考研] 一志愿东北大学化学314分求调剂 +3 lr1212.. 2026-03-02 3/150 2026-03-02 17:36 by yeahyou
[考研] 一志愿华中科技大学，化学专业344分，求调剂 +3 邢xing1 2026-03-02 3/150 2026-03-02 17:32 by houyaoxu
[考研] 化工专硕348，一志愿985求调剂 +6 弗格个 2026-02-28 9/450 2026-03-02 14:09 by liyongv
[考研] 265分求调剂不调专业和学校有行学上就 +6 礼堂丁真258 2026-02-28 9/450 2026-03-02 12:04 by 52hz~~
[考研] 281求调剂 +5 2026计算机_诚心 2026-03-01 8/400 2026-03-02 11:05 by 汪！？！
[考研] 材料调剂 +6 爱擦汗的可乐冰 2026-02-28 7/350 2026-03-02 10:42 by Jy?
[考研] 调剂 +3 13853210211 2026-03-02 4/200 2026-03-02 10:16 by 13853210211
[考研] 材料工程269求调剂 +3 白刺玫 2026-03-02 3/150 2026-03-02 09:25 by 一休哥FU
[考研] 307求调剂 +5 wyyyqx 2026-03-01 5/250 2026-03-01 15:21 by Fff-1
[考研] 304求调剂 +3 52hz~~ 2026-02-28 5/250 2026-03-01 00:00 by 52hz~~
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭