应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » western主带附近有很细的条带
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
61/1返回列表
查看: 854  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

weizhi111

实习版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

[求助] western主带附近有很细的条带 已有3人参与

目的蛋白是第一张图，这次两张膜上都出现主带附近有一些比较细的条带，同样的样品和抗体前几天刚做过一轮，效果还挺好，只是上样量没太调好，所以这次重新做了。内参actin还正常，目的蛋白条带不好啊，求大神帮助！
western主带附近有很细的条带
BRM 1-16-1.jpg


western主带附近有很细的条带-1
ACTIN1 1-16.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2014-01-17 07:39:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wukaixz

专家顾问

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
weizhi111: 金币+5 2014-01-18 08:48:40
1.抗体是不是回收重复利用的？重复利用的抗体效价会降低。
2.样品是不是放的时间长了？蛋白有些降解，建议重新取样。若不是，可以用以前的样品做个阳性对照。看是否也是这样。
3.杂一抗前用5%的脱脂奶粉封闭30min,可以降低背景和杂带。
原因很多的，问一问你师兄师姐。

祝实验顺利！
赞一下 回复此楼
2楼2014-01-17 09:01:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

daibingling

超级版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
封闭的不彻底，导致杂条带很多。
赞一下 回复此楼
3楼2014-01-17 11:28:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weizhi111

版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
2楼: Originally posted by wukaixz at 2014-01-17 09:01:06
1.抗体是不是回收重复利用的？重复利用的抗体效价会降低。
2.样品是不是放的时间长了？蛋白有些降解，建议重新取样。若不是，可以用以前的样品做个阳性对照。看是否也是这样。
3.杂一抗前用5%的脱脂奶粉封闭30min ...

谢谢，抗体确实是回收用的（第二次），样品放的时间也不太长，前几天刚做过一轮，效果还不错。（希望不是降解，要不然重提就比较麻烦，还要重取样）。我确实是用5%脱脂奶封闭的，并且封闭了1.5小时，上次也是这么做的。
赞一下 回复此楼
4楼2014-01-17 14:23:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wolfman840

专家顾问

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果抗体没有问题，且已经封闭了的话，那最有可能就是蛋白降解了。你再提一次试试，蛋白保存在什么条件下的也要追溯一下。
赞一下 回复此楼
5楼2014-01-17 15:10:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weizhi111

主管区长

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
5楼: Originally posted by wolfman840 at 2014-01-17 15:10:23
如果抗体没有问题，且已经封闭了的话，那最有可能就是蛋白降解了。你再提一次试试，蛋白保存在什么条件下的也要追溯一下。

目的蛋白的那两张膜中，一张是几天前刚做过的样品，是变过性保存的，两一张膜上是新提的 蛋白
赞一下 回复此楼
6楼2014-01-17 22:07:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 weizhi111 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿 南京航空航天大学 ，080500材料科学与工程学硕 +10 @taotao 2026-03-31 11/550 2026-04-01 09:43 by xiayizhi
[考研] 0856材料化工调剂 总分330 +18 zhubinhao 2026-03-27 18/900 2026-04-01 09:37 by oooqiao
[考研] 求调剂，一志愿 南京航空航天大学 ，080500材料科学与工程学硕，总分289分 +10 @taotao 2026-03-29 10/500 2026-04-01 09:30 by oooqiao
[考研] 333求调剂 +4 阿科逸 2026-03-31 4/200 2026-04-01 09:11 by jp9609
[考研] 0805求调剂 +6 是水分 2026-03-31 6/300 2026-04-01 09:05 by oooqiao
[考研] 362求调剂 +10 西南交材料专硕3 2026-03-31 10/500 2026-04-01 08:29 by JourneyLucky
[考研] 0856材料与化工调剂，339 +10 10213207 2026-03-31 10/500 2026-04-01 08:28 by Linda Hu
[考研] 一志愿北化085600材料专硕275|有文章专利｜求调剂 +16 Micky11223 2026-03-25 17/850 2026-03-31 22:04 by 544594351
[考研] 0856求调剂 +9 楒桉 2026-03-28 9/450 2026-03-31 19:06 by 暮泽12
[考研] 一志愿华东理工大学，080500学硕，317分，求调剂 +9 s1145 2026-03-31 9/450 2026-03-31 18:47 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +6 邱gl 2026-03-30 11/550 2026-03-31 16:34 by 邱gl
[考研] 287求调剂 +17 land xuxu 2026-03-26 17/850 2026-03-31 11:16 by Zzxxxs
[考研] 南京大学化学调剂 +11 景随风 2026-03-29 16/800 2026-03-31 10:14 by herarysara
[考研] 福建理工大学材料学院先进合金团队招收考研调剂学生 +3 大华金商都 2026-03-30 4/200 2026-03-31 01:04 by 方英俊602
[考研] 11408总分309，一志愿东南大学求调剂，不挑专业 +5 天赋带到THU 2026-03-29 6/300 2026-03-30 20:49 by dick_runner
[考研] 337求调剂 +6 《树》 2026-03-29 6/300 2026-03-30 10:15 by herarysara
[考研] 数一英一271专硕（085401）求调剂，可跨 +7 前行必有光 2026-03-28 8/400 2026-03-28 23:22 by 小木虫tim
[考研] 本科新能源科学与工程，一志愿华理能动285求调剂 +3 AZMK 2026-03-27 5/250 2026-03-28 16:19 by xxxsssccc
[考研] 283求调剂 +3 A child 2026-03-28 3/150 2026-03-28 15:41 by ms629
[考研] 266求调剂 +11 阳阳哇塞 2026-03-27 12/600 2026-03-27 17:56 by yu221
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭