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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR后跑胶没有任何条带
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雪舞银风

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

模板没问题，条件没问题，taq没问题，要么是你引物问题，要么是根本没表达，用基因组DNA吧……

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41楼2014-02-02 10:37:26
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befward2008

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

是不是你的反向引物没有把序列设成反向互补啊？
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42楼2014-02-18 09:30:42
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额敏的雪

金虫 (著名写手)
引用回帖:
41楼: Originally posted by 雪舞银风 at 2014-02-02 10:37:26
模板没问题，条件没问题，taq没问题，要么是你引物问题，要么是根本没表达，用基因组DNA吧……

用基因组DNA试过，没有条带
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43楼2014-02-18 15:35:28
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额敏的雪

金虫 (著名写手)
引用回帖:
42楼: Originally posted by befward2008 at 2014-02-18 09:30:42
是不是你的反向引物没有把序列设成反向互补啊？

反向互补了
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44楼2014-02-18 15:35:44
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额敏的雪

金虫 (著名写手)
引用回帖:
40楼: Originally posted by mao081312 at 2014-02-02 08:31:49
你的基因序列大约有多大？太大的片段用普通酶不太好扩增

不大，2000以内
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45楼2014-02-18 15:37:12
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雪舞银风

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
43楼: Originally posted by 额敏的雪 at 2014-02-18 15:35:28
用基因组DNA试过，没有条带...

换引物吧，可能是引物在高保真酶里面结合效率不高……

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46楼2014-02-18 16:03:14
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
试着把退火温度降低一下看看有没有    做一个检测看看就行
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47楼2014-02-18 16:53:44
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额敏的雪

金虫 (著名写手)
引用回帖:
46楼: Originally posted by 雪舞银风 at 2014-02-18 16:03:14
换引物吧，可能是引物在高保真酶里面结合效率不高……
...

谢谢

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48楼2014-02-19 01:54:33
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额敏的雪

金虫 (著名写手)
引用回帖:
47楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-02-18 16:53:44
试着把退火温度降低一下看看有没有    做一个检测看看就行

谢谢

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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49楼2014-02-19 01:54:58
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dy520

银虫 (初入文坛)
你好  请问跑胶没有任何条带这个问题你解决 了吗   ？我现在也是这个问题，换了几种酶做了温度梯度  还是没有任何条带    有个别时候甚至没有引物二聚体   搞不清是什么情况   一点条带没有   求助啊
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50楼2015-02-04 20:15:34
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