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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR后跑胶没有任何条带
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冰封之real

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

既然是cDNA，就有个目的基因表达不表达的问题，如果你的目的基因压根就没转录出RNA，自然cDNA就没有，那你无论设计多少引物都P不出来，就算有也是引物二聚体
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31楼2014-01-26 09:14:37
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treetreew

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

就是说你得体系没问题，你觉得cDNA出问题的可能性也不大
10对儿引物再搞不定，几率也不大，
带个一定表达你那个分子的阳性control就好了
再没有，就是引物出了问题，有了就有可能模版就是没有
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额敏的雪
32楼2014-01-26 10:18:22
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额敏的雪

金虫 (著名写手)
送红花一朵
引用回帖:
32楼: Originally posted by treetreew at 2014-01-26 10:18:22
就是说你得体系没问题，你觉得cDNA出问题的可能性也不大
10对儿引物再搞不定，几率也不大，
带个一定表达你那个分子的阳性control就好了
再没有，就是引物出了问题，有了就有可能模版就是没有

带个一定表达你那个分子的阳性control就好了，
这句话怎么理解？

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33楼2014-01-26 23:35:25
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treetreew

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你那个分子肯定有表达的cDNA，阳性组织，细胞系，甚至是转过的痣粒都行
用来证明你引物没问题，整个检测体系没问题。

你得目标cDNA，用一些其他的marker检测一下，就是它一定会有的，内参，特异性marker
用来证明你得cDNA没问题

这俩都做出来了，基本可以说你那个分子在你得目标cDNA终究是没有，那就是结果咯。
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34楼2014-01-27 07:27:15
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额敏的雪

金虫 (著名写手)
引用回帖:
34楼: Originally posted by treetreew at 2014-01-27 07:27:15
你那个分子肯定有表达的cDNA，阳性组织，细胞系，甚至是转过的痣粒都行
用来证明你引物没问题，整个检测体系没问题。

你得目标cDNA，用一些其他的marker检测一下，就是它一定会有的，内参，特异性marker
用来证 ...

哦，谢谢

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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35楼2014-01-27 13:44:48
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易水情殇

捐助贵宾 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感觉有可能你的序列结构有问题

[ 发自小木虫客户端 ]
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额敏的雪
think like a man, work like a boss
36楼2014-01-28 14:30:09
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额敏的雪

金虫 (著名写手)
送红花一朵
引用回帖:
36楼: Originally posted by 易水情殇 at 2014-01-28 14:30:09
感觉有可能你的序列结构有问题

怎么讲

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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37楼2014-01-28 21:46:47
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hg30717580

木虫 (职业作家)

总经理

【答案】应助回帖

一定要做对照哦。如果去扩增你的阳性对照能扩出条带，就说明引物没问题咯。。
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突破自我，喜迎曙光
38楼2014-01-29 18:09:59
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乌和尚

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你的引物在基因的位置不要在内含子上,重新比对你的引物序列是否在送往公司合成时序列给错
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39楼2014-01-29 22:23:52
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mao081312

铁虫 (小有名气)
你的基因序列大约有多大？太大的片段用普通酶不太好扩增

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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40楼2014-02-02 08:31:49
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