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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 请教HPLC的使用，不是仪器使用，是测药品的一般步骤，摸条件，建立方法等的步骤。
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匿名

金虫 (小有名气)
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1楼 2014-01-07 20:44:36
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lionguy

木虫 (著名写手)
摸索方法：
1、首先查阅资料，了解被测组分的化学结构和理化性质，例如结构中有共轭，那就意味着可以用紫外检测器；被测组分可以溶解于某种有机溶剂，您就可以考虑用该溶剂提取或者洗脱等等。若被测组分对热敏感，前处理时，注意控制温度；若被测组分易被氧化，前处理时可充氮保护等等。总之，前处理条件和色谱条件是由被测组分的化学结构和理化性质所决定的。
2、根据1设计出自己可行的方法即可，若是被测结构中没有共轭双键，紫外检测器无法使用，那就得想办法使用其他检测器了。
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12楼2014-02-16 10:43:15
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

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这个不是几句话就说的清楚的 一般药品测定都有标准的 USP或者EP 药典也可以参考下 实战的书可以推荐《药物色谱分析》 讲的很棒
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2楼2014-01-07 21:29:18
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匿名

金虫 (小有名气)
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3楼2014-01-08 11:16:33
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bhyxw

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by majunyu2007 at 2014-01-08 11:16:33
不是说什么标准什么的，这些我也会查， 我就想知道测一个药品的一般方法， 刚开始是要摸索条件---确定最佳波长，分离度，流动相体系，等等，是不是， 紧接着要方法学验证， 精密度，准确度，专一性， 检测限，等等 ...

对楼主提出的问题，回答部分，仅作交流。
1.如何确定最佳波长？可以用液相自带的紫外或单独的紫外分光光度计扫个谱，在不超过流动相的吸收截止波长情况下，选择一个最佳吸收波长。
2.如何确定流动相体系？一般是甲醇，乙腈，四氢呋喃，水等一种或2种的混合，再保证溶解度的前提下，配制不同极性的流动相体系。
3.关于检测限？一般紫外吸光光度值在0.3-0.7之间比较准确可靠，故配制的样品浓度吸光度最好在这个范围，由于检测器的不同，本人一般是保持在1.0左右。
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4楼2014-01-08 11:26:03
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