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[求助] pbs缓冲溶液配制已有1人参与

0.5MPBS缓冲溶液pH为8怎么配

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1楼 2014-01-07 14:59:42

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jinyan2102

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【答案】应助回帖

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磷酸缓冲液(Gomori缓冲液)

最通用的磷酸盐缓冲液是以其发明者Gomori命名的。该缓冲液是由单价磷酸二氢盐和双价磷酸一氢盐的混合物组成的。通过变化每种盐的量，就可配制出pH 5.8至pH8.0之间缓冲液(见表A1-3A和A1-3。磷酸盐有很高的缓冲能力，在水中高度可溶。但是，它们也有不少潜在的缺点：

•磷酸盐缓冲液抑制许多酶促反应和步骤，而这些酶促反应和步骤恰恰是分子克隆的基础，其中包括许多限制酶对DNA的切割，DNA的连接和细菌转化等。

•因为磷酸盐在乙醇中沉淀，不能用于沉淀DNA和RNA。

•磷酸盐螯合像Ca2+和Mg2+这样的阳离子。

表A1-3A 25℃下0.1mol/L磷酸钾缓冲液的配制

pH  1 mol/L K2HP04的体积/mL  1 mol/L KH2PO4的体积/mL

5.8  8.5  91.5

6.0  13.2  86.8

6.2  19.2  80.8

6.4  27.8  72.2

6.6  38.1  61.9

6.8  49.7  50.3

7.0  61.5  38.5

7.2  71.7  28.3

7.4  80.2  19.8

7.6  86.6  13.4

7.8  90.8  9.2

8.0  94.0  6.0

注：根据Green(1933)的资料汇编。

用蒸馏水将混合的两种1mol/L的贮存液稀释至1000mL。根据Henderson-Hasselbaleh方程计算其pH值：

pH=pK'+Log ，在此，pK'=6.86(25℃)

表A1-3B 25℃下0.1mol/L磷酸钠缓冲液的配制

pH  1mol/L Na2HPO4的体积/mL  1mol/L NaH2P04体积/mL

5.8  7.9  92.1

6.0  12.0  88.0

6.2  17.8  82.2

6.4  25.5  74.5

6.6  35.2  64.8

6.8  46.3  53.7

7.0  57.7  42.3

7.2  68.4  31.6

7.4  77.4  22.6

7.6  84.5  15.5

7.8  89.6  10.4

8.0  93.2  6.8

注：根据ISCO(1982)的资料汇编

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