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wangweijian

金虫 (小有名气)

[求助] 引物3‘端标记生物素 已有1人参与

最近再看PCR+反向膜杂交法检测hpv方面的资料,文献中用到的引物3’端标记生物素,引物3’端修饰后,难道不会影响PCR反应中的延伸步骤吗?这样能P出带有生物素标记的产物吗?我觉得生物素最好还是标记在5‘端,各位有何指教?
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-01-07 08:49:58
生物素和引物之间会有很长的arm,对引物延伸不会太大的阻碍。
行至水穷处,坐看云起时
2楼2014-01-06 14:34:38
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wangweijian

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by pennchem at 2014-01-06 14:34:38
生物素和引物之间会有很长的arm,对引物延伸不会太大的阻碍。

还不是太明白,3‘端-OH与生物素结合后,不就失去了与其它碱基5’-磷酸结合的能力了啊,难道生物素标记的不是3‘-OH而是2’-H?
3楼2014-01-07 14:49:17
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