应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助，绝对定量PCR低浓度的标准品ct值几乎一致是什么原因？
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 3587  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

destinygazer

新虫 (初入文坛)

[交流] 求助，绝对定量PCR低浓度的标准品ct值几乎一致是什么原因？ 已有3人参与

绝对定量的实验中，为什么我低浓度的几个的CT值都差不多啊？稀释倍数是10的6次方到10的0次方。可是从10的2次方开始，几个标准品的ct值都几乎在一样的25,26。请问这是什么原因呢？
用的是ABI7300的机器。
求助，绝对定量PCR低浓度的标准品ct值几乎一致是什么原因？
1.jpg


求助，绝对定量PCR低浓度的标准品ct值几乎一致是什么原因？-1
2.jpg


求助，绝对定量PCR低浓度的标准品ct值几乎一致是什么原因？-2
3.jpg


求助，绝对定量PCR低浓度的标准品ct值几乎一致是什么原因？-3
4.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-12-31 15:23:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by destinygazer at 2014-01-03 11:33:49
可是我师兄也是这样做的，他用的是7500，可能试剂不一样，但是他都有结果的。是不是试剂的问题导致扩增不正常呢？...

一般不会。比较有信誉的大公司的试剂是有保证的。如果你怀疑试剂的问题，为什么不用与师兄相同的试剂做？
看你的扩增曲线就知道，有些反应不正常。扩增你的目的基因时用浓度最高的CT值是16，如果再稀释10^6（最稀的样品），CT的理论值是36。CT值高于35基本上是不可信的数据了。何况这是在扩增效率为100%的理想情况，低浓度的模板的扩增效率会下降。如果你非要10倍稀释模板，通常的标准曲线上只能有4个点。用5倍稀释可以比较理想的满足CT在15-30之间取5-6个点。
赞一下 回复此楼
6楼2014-01-04 03:43:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-01-01 00:48:23
模板浓度太小，扩增不正常。一般做标准曲线5倍稀释就可以了，CT值最好在15-30之间。
赞一下 回复此楼
2楼2014-01-01 00:25:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

destinygazer

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2014-01-01 00:25:39
模板浓度太小，扩增不正常。一般做标准曲线5倍稀释就可以了，CT值最好在15-30之间。

可是我师兄也是这样做的，他用的是7500，可能试剂不一样，但是他都有结果的。是不是试剂的问题导致扩增不正常呢？
赞一下 回复此楼
3楼2014-01-03 11:33:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

意萧02

木虫 (正式写手)
谢谢楼主分享！！！
回复此楼
4楼2014-01-03 14:55:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿郑州大学，080500学硕，总分317分求调剂 +8 举个栗子oi 2026-03-24 9/450 2026-03-29 13:08 by peike
[考研] 070300化学354求调剂 +6 101次希望 2026-03-28 6/300 2026-03-29 12:57 by 无际的草原
[考研] 086000生物与医药调剂 +5 Feisty。 2026-03-28 9/450 2026-03-29 12:02 by longlotian
[考研] 本科新能源科学与工程，一志愿华理能动285求调剂 +3 AZMK 2026-03-27 5/250 2026-03-28 16:19 by xxxsssccc
[考研] 286求调剂 +12 PolarBear11 2026-03-26 12/600 2026-03-28 12:14 by zllcz
[考研] 085405 考的11408求各位老师带走 +3 Qiu学ing 2026-03-28 3/150 2026-03-28 09:19 by 乐呵呵的追梦人
[考研] 308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-27 7/350 2026-03-28 07:43 by 热情沙漠
[考研] 331环境科学与工程求调剂 +3 熠然好运气 2026-03-27 3/150 2026-03-28 04:11 by fmesaito
[考研] 085701环境工程求调剂 +9 多久上课 2026-03-27 9/450 2026-03-28 03:58 by fmesaito
[有机交流] 高温高压反应求助 10+4 chibby 2026-03-25 4/200 2026-03-27 21:08 by BT20230424
[考研] 08开头275求调剂 +4 拉谁不重要 2026-03-26 4/200 2026-03-27 14:12 by Delta2012
[考研] 一志愿华东理工大学081700，初试分数271 +6 kotoko_ik 2026-03-23 7/350 2026-03-27 12:29 by 惠州彭于晏
[考研] 材料科学与工程 317求调剂 +4 JKSOIID 2026-03-26 4/200 2026-03-26 15:58 by 不吃魚的貓
[考研] 打过很多竞赛，085406控制工程300分，求调剂 +3 askeladz 2026-03-26 3/150 2026-03-26 09:08 by 给你你注意休息
[考研] 290分调剂求助 +3 吉祥止止陈 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:58 by barlinike
[考研] 296求调剂 +4 汪！？！ 2026-03-25 7/350 2026-03-25 16:41 by 汪！？！
[考研] 347求调剂 +4 L when 2026-03-25 4/200 2026-03-25 13:37 by cocolv
[考研] 0854人工智能方向招收调剂 +4 章小鱼567 2026-03-24 4/200 2026-03-25 13:29 by 2177681040
[考研] 化工专硕求调剂 +3 question挽风 2026-03-24 3/150 2026-03-24 18:48 by jhhcooi
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境，总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-23 8/400 2026-03-23 20:36 by Creta
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭