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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 求助：HPLC标品和样品在相同的出峰时间出来了两个峰
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沐夜精灵

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助：HPLC标品和样品在相同的出峰时间出来了两个峰 已有5人参与

我使用高效液相分析谷氨酸的标品和样品，结果发现在相同的出峰时间出来了两个峰。如图1图2所示，出峰时间约1min到2min。
衍生化试剂是异硫氰酸苯酯，分析的样品是谷氨酸。
衍生化过程如下

样品衍生化
取100微升样品液，用0.1mol/L的盐酸定容到10mL，在离心管中分别加入500微升稀释后的样品液，250微升的异硫氰酸苯酯溶液，250微升三乙胺溶液，震荡混匀，放入柱温箱中恒温1个小时。1小时后再加入1mL正己烷，震荡混匀，放入柱温箱中10min。取下清液，过滤膜，进样。

求助大家为什么我的谷氨酸标品和样品有俩峰呢？
求助：HPLC标品和样品在相同的出峰时间出来了两个峰
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求助：HPLC标品和样品在相同的出峰时间出来了两个峰-1
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1楼 2013-12-30 16:34:01
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sxlsdnu

新虫 (初入文坛)
请问您的这个问题后来找到原因了吗？找到解决的方法了吗？如果找到了能否说一下解决的方法？拜托了
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18楼2017-11-23 20:33:18
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e_liang369

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
以前做过么？关键你这个东西都处在溶剂峰位置，甚至比溶剂峰出来的很早，是溶剂还是衍生化试剂里的东西还不知道呢
赞一下(1人) 回复此楼
悲催的研发！
2楼2013-12-30 16:39:07
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
release53: 金币+1, 感谢应助 2013-12-30 18:50:41
很简单，将衍生试剂异硫氰酸苯酯溶液，或者三乙胺进样，看看出峰位置，确定是否来自于它们的干扰，如果不是，可能是氨基酸分解、异构、杂质等各种可能性
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2013-12-30 16:46:53
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沐夜精灵

新虫 (初入文坛)
做过一个空白，不加样品，其他的衍生化试剂之类的都一样，在1-2min时候没有任何峰，在15-20min出现了峰，也就是说衍生化试剂的峰应该是15-20min时候的峰了
赞一下 回复此楼
4楼2013-12-30 16:56:59
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