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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » native-page活性染色
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海之韵-哈哈

银虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by weishen2 at 2014-01-07 18:41:52
我感觉这样的结果已经可以用了。如果楼主非要追求完美的话，楼主可以尝试多跑一段时间，或者把浓缩胶ph换成8.8，或者用10%的胶。
另外请教楼主native胶大概要跑多长时间，楼主蛋白的等电点是多少，蛋白是否有CBM结 ...

native胶跑了2.5小时，溴酚蓝前言快跑出去了，等电点大约为6，如果有CBM结构域会有什么影响 啊？
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严以律已，宽以待人
11楼2014-01-07 20:37:44
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weishen2

银虫 (小有名气)
CBM结构域可能会与木聚糖特异性结合，这样的胶会不会慢些；还是就直接留在木聚糖上，跑出的条带呈拖尾状
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12楼2014-01-07 22:17:31
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

原因很明显，就是在浸泡的时候酶把底物降解了，理论上来说，酶在跑过的地方是不会停留的，实际上是会有很少很少的酶是停留了的，在电泳结束后，保温的时候就会也参与降解底物。而且，酶在电泳过程中是会发挥一点点降解底物的能力的。我认为就是这两个原因造成你的降解区有点拖，下次所有条件不变，将酶再次稀释吧，就不止是100倍这么简单了，250、1000、2500和1000倍，这四个可能1000倍的会出现很锋利的单条降解带。而且，我觉得刚果红里面有没有必要加乙醇，我没加，也是能做得出来的。我不能给你看图片，因为我只不过是做过一次，而且那不是我学位论文的内容。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
13楼2014-01-07 22:42:08
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FLY.

新虫 (初入文坛)
科研新人，求助Native-PAGE活性染色原理，最好详细一些，感激不尽
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14楼2017-06-29 17:06:36
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