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海之韵-哈哈

银虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by weishen2 at 2014-01-07 18:41:52
我感觉这样的结果已经可以用了。如果楼主非要追求完美的话,楼主可以尝试多跑一段时间,或者把浓缩胶ph换成8.8,或者用10%的胶。
另外请教楼主native胶大概要跑多长时间,楼主蛋白的等电点是多少,蛋白是否有CBM结 ...

native胶跑了2.5小时,溴酚蓝前言快跑出去了,等电点大约为6,如果有CBM结构域会有什么影响 啊?
严以律已,宽以待人
11楼2014-01-07 20:37:44
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weishen2

银虫 (小有名气)

CBM结构域可能会与木聚糖特异性结合,这样的胶会不会慢些;还是就直接留在木聚糖上,跑出的条带呈拖尾状
12楼2014-01-07 22:17:31
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

原因很明显,就是在浸泡的时候酶把底物降解了,理论上来说,酶在跑过的地方是不会停留的,实际上是会有很少很少的酶是停留了的,在电泳结束后,保温的时候就会也参与降解底物。而且,酶在电泳过程中是会发挥一点点降解底物的能力的。我认为就是这两个原因造成你的降解区有点拖,下次所有条件不变,将酶再次稀释吧,就不止是100倍这么简单了,250、1000、2500和1000倍,这四个可能1000倍的会出现很锋利的单条降解带。而且,我觉得刚果红里面有没有必要加乙醇,我没加,也是能做得出来的。我不能给你看图片,因为我只不过是做过一次,而且那不是我学位论文的内容。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
13楼2014-01-07 22:42:08
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FLY.

新虫 (初入文坛)

科研新人,求助Native-PAGE活性染色原理,最好详细一些,感激不尽
14楼2017-06-29 17:06:36
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