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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » native-page活性染色
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海之韵-哈哈

银虫 (小有名气)

[求助] native-page活性染色 已有3人参与

最近在做native-page活性染色，蛋白为木聚糖酶，理论上染色脱色后目的条带处应为无色且为单一条带，胶的其余部分应为红色。但是我做出来的结果是从点样孔到胶的三分之一处是无色的，而不是一条单一的条带，感觉目的蛋白是边跑边反应。（跑胶时是在冰浴中进行的）请问有没有这种边跑边反应的可能性啊？如何避免这种情况？
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严以律已，宽以待人
1楼 2013-12-29 22:19:26
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海之韵-哈哈

银虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by weishen2 at 2014-01-07 18:41:52
我感觉这样的结果已经可以用了。如果楼主非要追求完美的话，楼主可以尝试多跑一段时间，或者把浓缩胶ph换成8.8，或者用10%的胶。
另外请教楼主native胶大概要跑多长时间，楼主蛋白的等电点是多少，蛋白是否有CBM结 ...

native胶跑了2.5小时，溴酚蓝前言快跑出去了，等电点大约为6，如果有CBM结构域会有什么影响 啊？
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严以律已，宽以待人
11楼2014-01-07 20:37:44
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weishen2

银虫 (小有名气)
顶一下！我最近也打算做native-page，但是不知道从何入手，希望楼主传授下经验。
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2楼2014-01-04 10:23:20
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lyt26802

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助！ 2014-01-05 16:17:09
是不是酶的活性太大了 它走过的地方都显示成无色了
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3楼2014-01-04 21:48:28
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海之韵-哈哈

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lyt26802 at 2014-01-04 21:48:28
是不是酶的活性太大了 它走过的地方都显示成无色了

如果是这样的话，是不是把酶液稀释了会好些啊？
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严以律已，宽以待人
4楼2014-01-05 13:47:20
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