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fanwq258

木虫 (正式写手)

[求助] invitrogen gateway TOPO克隆移码突变问题求助

我现在在用invitrogen的gateway TOPO克隆,然后通过LR反应将目的基因转入我的表达载体中,现在有个问题想请教您,我引物设计的时候上游为CACC+A+起始密码子ATG,多加了一个A,在共表达的时候会产生移码突变吗?我的表达载体是P35S+YFP+目的基因。谢谢!!!
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要么好好活,要么死,拒绝半死不活
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lechang

新虫 (初入文坛)

应该会产生。应该是CACCTG,因为在35s后加了蛋白标签。我现在在用invitrogen的也是gateway TOPO克隆。但LR反应,长的密密麻麻的全是菌落,还没有阳性菌落怎么办。
2楼2015-09-26 17:24:31
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