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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 链霉菌基因组DNA的大提
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dgm1208

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by bikexmx at 2013-12-24 09:17:12
跑电泳没有条带吗？个人认为可能是样品里还存有蛋白质等杂质，可以再用氯仿-异戊醇抽提一下，楼主用的是什么方法提的，我们实验室一般用CTAB法，可以让溶菌酶和蛋白酶多反应一会，去除多余杂质，希望对你有帮助

感谢你的回复，能告知一下贵实验室的ctab的具体实验步骤吗？不胜感激···
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科研路艰辛···
11楼2013-12-24 11:55:37
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dgm1208

银虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by taoway at 2013-12-24 09:46:09
另外，我们长期提取链霉菌总DNA都是用溶菌酶方法提取的，你也可以试一下用此法小量提取下gDNA。
1.        取一干净Ep管，添加30 ul菌丝体至500 ul SET buffer，加10 ul Lysozyme solution (50 mg/ml)，混匀后37℃ 水浴3 ...

贵实验室大提吗？能够告知一下大提的实验步骤？不胜感激···
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科研路艰辛···
12楼2013-12-24 11:59:18
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开云者

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by dgm1208 at 2013-12-24 08:49:45
感谢你的回复，有手提的方法吗？之前实验室有人用试剂盒提过，提出的dna质量不高，你说的德国的那个确实有点小贵啊···...

手提的没有，德国贵的话你就买OMEGA公司的，这个还算便宜些，效果也挺好
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挥霍不起青春
13楼2013-12-24 18:28:56
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taoway

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
12楼: Originally posted by dgm1208 at 2013-12-24 11:59:18
贵实验室大提吗？能够告知一下大提的实验步骤？不胜感激···...

大提就把上面的量等比例放大就行了，其实你做个杂交的话做小量提取就够了，可以同时多提几管。我们都是这么做的，就算是用来建库的gDNA也是稍稍放大体系，提个3-4管就可以了！希望能帮到你！
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14楼2013-12-24 23:37:35
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dgm1208

银虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by taoway at 2013-12-24 09:46:09
另外，我们长期提取链霉菌总DNA都是用溶菌酶方法提取的，你也可以试一下用此法小量提取下gDNA。
1.        取一干净Ep管，添加30 ul菌丝体至500 ul SET buffer，加10 ul Lysozyme solution (50 mg/ml)，混匀后37℃ 水浴3 ...

我怎么给不了分了？
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科研路艰辛···
15楼2013-12-25 21:14:26
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dgm1208

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by bikexmx at 2013-12-24 09:17:12
跑电泳没有条带吗？个人认为可能是样品里还存有蛋白质等杂质，可以再用氯仿-异戊醇抽提一下，楼主用的是什么方法提的，我们实验室一般用CTAB法，可以让溶菌酶和蛋白酶多反应一会，去除多余杂质，希望对你有帮助

谢谢你的回复，操作失误了把100都给你了，让你赚到了···
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科研路艰辛···
16楼2013-12-26 18:20:50
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