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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 细胞培养过程中培养液变黄
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我听五月天

木虫 (正式写手)

[求助] 细胞培养过程中培养液变黄 已有11人参与

跟别人要的海拉细胞（DMEM培养的），传代两次后就挂了。期间，拿到细胞第二天就看到细胞轮廓开始变得不清晰、不透亮。之后细胞培养液（都是1640高糖）一天内就变黄，一天早晚换两次。后来轮廓更不清晰、细胞更不透亮。就改用DMEM培养，更换两次培养液后培养液浑浊了，显微镜下的细胞看上去都好像烧过的纸一样。就丢弃了。请教大神们这是什么原因？？？？？
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为爱而生
1楼 2013-12-23 15:59:48
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sxxuan

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
我听五月天: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-12-27 17:12:51
hela细胞很皮实很好养的，首先要排除污染问题，支原体/细菌/培养基有没有污染等
哪怕是长过了，也只是细胞状态不好或者太密所以死细胞多，而 不会出现很浑浊然后死掉的情况
曾经试过培养箱没有二氧化碳了但hela还能继续生长，只是慢一些。怀疑培养箱的话可以尝试把二氧化碳量调低一点。
如果是从别的地方拿回来的细胞，也要考虑运输过程有没有染菌，如果是的话，也有可能传代一两次才开始大规模地染菌的
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你的日子如何，你的力量也必如何！
12楼2013-12-26 13:55:56
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刘璐19890614

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
我听五月天: 金币+2, ★有帮助 2013-12-27 16:25:49
是不是细胞本身有问题？不是很懂，来长知识的
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加油
2楼2013-12-24 09:07:30
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western虫

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
silicare: 金币+2, 谢谢参与 2013-12-24 18:03:06
建议测试一下培养箱的CO2的浓度，后面变浑浊应该是细胞碎片吧，如果是染菌就没的说了。细胞在无污染条件下坏死，建议从理化性质去考虑，比如温度和CO2浓度是否要校正
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ForDream！
3楼2013-12-24 12:31:37
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tinytan

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
silicare: 金币+4, 谢谢参与 2013-12-24 18:03:25
1.有无染细真菌？2.细胞传代次数过多？3.培养箱校准？4.操作过于粗放？

[ 发自小木虫客户端 ]
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4楼2013-12-24 12:37:28
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