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王文静341

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助:色谱条件相同,隔段时间后进样,出峰情况为什么变化? 已有4人参与

最近在做HPLC的成分含量测定,同时测两种成分,经过筛选各种流动相系统,暂定乙腈-0.033磷酸盐(磷酸调pH3),隔一周后相同条件(色谱柱,流动相系统条件,色谱仪,样品等),重复进样后,两成分峰拖尾因子由原来的1.5增到2多,请问为什么呢?好不容易确定的方法呢,唉唉
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潜心学习
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ayata

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个柱子是不是用过以后变化了,室温是不是不一样
3楼2013-12-20 15:37:48
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查看全部 11 个回答

顾莫柔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
王文静341: 金币+2 2013-12-20 16:46:15
建议:1.在流动相中加三乙胺;2.降低进样量或进样浓度;3.消除柱外死体积效应;4.100%异丙醇低流速冲洗柱子。
矫情的不是我是生活,残忍的不是我是很多。
2楼2013-12-20 15:34:27
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yi_wang

铁杆木虫 (著名写手)

roye

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
是不是可以考虑柱温的问题,柱温不同有可能影响拖尾因子和分离情况。
哥泡的不是论坛,是寂寞....
4楼2013-12-20 16:42:15
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王文静341

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by ayata at 2013-12-20 15:37:48
这个柱子是不是用过以后变化了,室温是不是不一样

中间用过别的流动相,是不是柱子没冲干净?可是我甲醇10-50-100各1h冲了呢
潜心学习
5楼2013-12-20 16:44:47
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