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ayeqiu

木虫 (小有名气)

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虫号: 2187603
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专业: 抗体工程学

[求助] sf9细胞贴壁培养后如何传代已有2人参与

最近新购买了一支sf9细胞株，复苏后直接进行贴壁培养，发现细胞贴壁非常紧。传代时直接用手拍培养瓶，基本上看不到细胞脱落！改用手拿细胞培养瓶朝着超净台拍，约8-10下，也只能使很小一部分细胞脱离甁壁，看到这种迹象后，用玻璃弯管也要吹打很久（约10min）才能把细胞基本上吹落；同时在这之前尝试过一次加入胰酶消化后用玻璃弯管吹打，感觉还是贴壁很紧，亦是用了约7-8min才将细胞基本吹落……而上述的操作都对细胞造成很大的损伤，细胞活力降低到百分之六十左右！且细胞传代后出现大量的细胞碎片，还有部分细胞继续鼓胀死亡，漂浮的细胞也很多，活率太低了~~（奈何显微镜无法拍照，只能附图为从ATCC上找到的，我的细胞吹下来有小团块和碎片，但是2-3d后长到一定密度比图片看起来状态好得多）
求有经验的前辈指导和分析，如何对sf9细胞进行传代比较合适（例如吹吸力度的把控等小细节），这张图片上的细胞状态就算是很好的了？感谢！

sf9细胞

[ Last edited by ayeqiu on 2013-12-19 at 10:40 ]

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