24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 1540  |  回复: 17
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

海之韵-哈哈

银虫 (小有名气)

[求助] 包涵体纯化 已有2人参与

由于表达的目的蛋白主要是以包涵体的形式存在,所以想做包涵体纯化。用8M尿素溶解包涵体,用镍柱进行纯化。(标签是His标签)1:包涵体溶解液;2:15mM咪唑洗脱液;3:15mM咪唑洗脱液;4:50mM咪唑洗脱液;5::500mM咪唑洗脱液。箭头处为目的蛋白。感觉目的蛋白大部分没有挂柱子,这是为什么啊?请各位高手帮忙分析一下吧

包涵体纯化
无标题.jpg

[ Last edited by 海之韵-哈哈 on 2013-12-16 at 21:38 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

严以律已,宽以待人
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

海之韵-哈哈

银虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by zilinweizhu at 2013-12-18 15:11:11
你的柱子是新的吗?...

是新的,用的 Ni-NTA His-Bind Resin
严以律已,宽以待人
6楼2013-12-18 17:47:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 18 个回答

zilinweizhu

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你把咪唑浓度再降一下试试,还有就是你用了几个His作为标签,太少结合力弱就容易被洗脱,尿素溶解包涵体效果有时候不是很好,你可以试试盐酸胍溶解包涵体,然后上柱子后再把盐酸胍洗掉
3楼2013-12-17 09:30:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zilinweizhu

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 海之韵-哈哈 at 2013-12-18 14:59:28
用的是6个His标签。...

你的柱子是新的吗?
5楼2013-12-18 15:11:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

海之韵-哈哈

银虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by zilinweizhu at 2013-12-18 15:11:11
你的柱子是新的吗?...

买来一直在4度保存的。
严以律已,宽以待人
7楼2013-12-18 17:47:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 复试调剂 +21 积极向上; 2026-04-10 23/1150 2026-04-15 12:50 by 西北望—风沙
[考研] 291求调剂 +5 关忆北. 2026-04-14 5/250 2026-04-15 09:30 by 逆水乘风
[考研] 一志愿鲁东大学071000生物学学硕初试分数276求调剂 +26 慕绝cc 2026-04-09 30/1500 2026-04-14 18:50 by 蔡苏阳
[考研] 一志愿085502,267分求调剂 +19 再忙也要吃饭啊 2026-04-08 20/1000 2026-04-14 16:03 by zs92450
[考研] 290求调剂 +21 luoziheng 2026-04-10 23/1150 2026-04-14 15:49 by zs92450
[考研] 245求调剂 +6 冰糖橘?汽水 2026-04-13 10/500 2026-04-14 10:49 by jyl0317
[考研] 一志愿211 0703化学 346分求调剂 +26 土豆er? 2026-04-09 29/1450 2026-04-13 15:15 by 独醉梦孤城
[考研] 339求调剂 +4 hanwudada 2026-04-12 4/200 2026-04-13 12:03 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿0807 数一英一 313 有没有二轮调剂 +12 emokidd 2026-04-08 13/650 2026-04-13 08:32 by lhj2009
[考研] 322求调剂 +6 123安康 2026-04-12 13/650 2026-04-12 15:51 by 123安康
[考研] 求调剂 +16 张番茄不炒蛋 2026-04-10 17/850 2026-04-12 13:58 by 熬夜成!
[考研] 085410 273求调剂 +10 X1999 2026-04-09 10/500 2026-04-12 09:24 by 逆水乘风
[考研] 药学专硕调剂 +8 ? 一路生?花? 2026-04-10 10/500 2026-04-11 21:21 by zhouxiaoyu
[考研] 283求调剂 086004考英二数二 +17 那个噜子 2026-04-10 18/900 2026-04-11 16:27 by 明月此时有
[考研] 工科273调剂 +6 X1999 2026-04-09 7/350 2026-04-11 10:23 by zhq0425
[考研] 0854调剂 +8 950824he@ 2026-04-09 8/400 2026-04-11 10:11 by zhq0425
[考研] 289 分105500药学专硕求调剂(找B区学校) +6 白云123456789 2026-04-09 8/400 2026-04-10 21:13 by zhouxiaoyu
[考研] 一志愿京区985,085401电子信息,本科电子信息 +3 阳光开朗的男孩 2026-04-10 3/150 2026-04-10 16:29 by sophia_93
[考研] 282,电气工程专业,求调剂,不挑专业 +9 jggshjkkm 2026-04-10 9/450 2026-04-10 14:55 by 逆水乘风
[考研] 一志愿中科大070300化学,314分求调剂 +12 wakeluofu 2026-04-09 12/600 2026-04-10 09:57 by liuhuiying09
信息提示
请填处理意见