24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 1541  |  回复: 17
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

海之韵-哈哈

银虫 (小有名气)

[求助] 包涵体纯化 已有2人参与

由于表达的目的蛋白主要是以包涵体的形式存在,所以想做包涵体纯化。用8M尿素溶解包涵体,用镍柱进行纯化。(标签是His标签)1:包涵体溶解液;2:15mM咪唑洗脱液;3:15mM咪唑洗脱液;4:50mM咪唑洗脱液;5::500mM咪唑洗脱液。箭头处为目的蛋白。感觉目的蛋白大部分没有挂柱子,这是为什么啊?请各位高手帮忙分析一下吧

包涵体纯化
无标题.jpg

[ Last edited by 海之韵-哈哈 on 2013-12-16 at 21:38 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

严以律已,宽以待人
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

海之韵-哈哈

银虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by zilinweizhu at 2013-12-18 15:11:11
你的柱子是新的吗?...

是新的,用的 Ni-NTA His-Bind Resin
严以律已,宽以待人
6楼2013-12-18 17:47:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 18 个回答

zilinweizhu

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你把咪唑浓度再降一下试试,还有就是你用了几个His作为标签,太少结合力弱就容易被洗脱,尿素溶解包涵体效果有时候不是很好,你可以试试盐酸胍溶解包涵体,然后上柱子后再把盐酸胍洗掉
3楼2013-12-17 09:30:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zilinweizhu

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 海之韵-哈哈 at 2013-12-18 14:59:28
用的是6个His标签。...

你的柱子是新的吗?
5楼2013-12-18 15:11:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

海之韵-哈哈

银虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by zilinweizhu at 2013-12-18 15:11:11
你的柱子是新的吗?...

买来一直在4度保存的。
严以律已,宽以待人
7楼2013-12-18 17:47:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 22408 312求调剂 +17 门路摸摸 2026-04-14 18/900 2026-04-15 13:11 by 西北望—风沙
[考研] 复试调剂 +21 积极向上; 2026-04-10 23/1150 2026-04-15 12:50 by 西北望—风沙
[考研] 求调剂学校 +13 不会吃肉 2026-04-13 15/750 2026-04-15 12:49 by 西北望—风沙
[考研] 化学070300 求调剂 +23 哈哈哈^_^ 2026-04-12 23/1150 2026-04-14 16:30 by zhouxiaoyu
[考研] 290求调剂 +21 luoziheng 2026-04-10 23/1150 2026-04-14 15:49 by zs92450
[考研] 本科211,报考085601-310分 +16 ararak 2026-04-13 16/800 2026-04-14 14:55 by Delta2012
[考研] 食品与营养(0955)271求调剂 +15 升格阿达 2026-04-12 16/800 2026-04-14 13:18 by 浮若_安生
[考研] 300分求调剂 (085501机械专硕,本科扬大) +9 xu@841019 2026-04-11 10/500 2026-04-14 08:48 by 木木mumu~
[考研] 材料复试求调剂 +24 xhhdjdjsjks 2026-04-09 24/1200 2026-04-13 15:49 by 幸免 ..
[考研] 296求调剂 +14 汪!?! 2026-04-10 16/800 2026-04-12 10:48 by zhouyuwinner
[考研] 291求调剂 +8 关忆北. 2026-04-11 8/400 2026-04-12 09:32 by 逆水乘风
[考研] 电子信息279求调剂,有书读就行 +8 wwwooden 2026-04-08 11/550 2026-04-11 20:22 by cq2548
[考研] 农业管理302分求调剂 +3 xuening1 2026-04-10 3/150 2026-04-11 10:18 by zhq0425
[考研] 0858求调剂 5+5 Gky09300550, 2026-04-10 8/400 2026-04-10 19:13 by chemisry
[考研] 初试261 +3 Asht少 2026-04-10 6/300 2026-04-10 16:38 by Asht少
[考研] 344求调剂 +7 丶风雪夜归人丶 2026-04-09 7/350 2026-04-10 12:05 by pengliang8036
[考研] 一志愿中南大学物理学,英一66,求调剂 +4 长烟旖旎 2026-04-08 5/250 2026-04-10 10:31 by 颖果儿
[考研] 本科西工大 0856 324求调剂 +10 wysyjs25 2026-04-09 11/550 2026-04-10 08:37 by 5268321
[考研] 086004 求调剂 309 +7 Yin DY 2026-04-08 7/350 2026-04-09 13:59 by Delta2012
[考研] 招收有机化学、化工,药学,食品灯专业学生 +3 yrfhjgdj 2026-04-08 3/150 2026-04-09 10:15 by QYQX_123
信息提示
请填处理意见