应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » pUC 19 plasmid作对照的原理及操作
51/1返回列表
查看: 2575  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

柠檬可乐星

新虫 (小有名气)

[交流] pUC 19 plasmid作对照的原理及操作

我的PCR产物要做克隆，买了Takara的感受态，里面有一管pUC 19 plasmid，查了说明书说是做对照用的，但没写具体怎么做，对它的原理也不清楚。
所以请各位大虾指点一下，最好从pUC 19 plasmid的结构上给我说明一下：1、它做对照的原理；2、起到什么作用；3、具体如何操作（我的连接液体系是：2.5ul solution  I+2ul 胶回收DNA+0.5ul T-vector，加到50ul感受态细胞中）。
本来就是做分子的新手，现又遇到各种问题，做克隆也是完全自己查资料摸索着做，没有师兄师姐带的菜鸟伤不起啊！
求高手不吝指教！
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

小知识

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2013-12-13 10:42:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by 柠檬可乐星 at 2013-12-13 18:16:00
您好！
还想问一下，第二个问题：有师兄说pUC 19 plasmid是空质粒，用来做阴性对照的，把我搞糊涂了。第三个问题：您能不能跟我说一下怎么用pUC 19做对照实验吗？
谢谢！...

第三个问题，你得看T Vector的说明书，里面有没有提供片段给你做连接反应的对照，用pUC 19是做不了的，pUC 19的作用上面我已经讲了
赞一下 回复此楼
6楼2013-12-13 21:48:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

gyesang

荣誉版主 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
柠檬可乐星: 金币+5 2013-12-14 17:55:58
"买了Takara的感受态，里面有一管pUC 19 plasmid "
1、它做对照的原理；
pUC 19 plasmid是附在感受态里面的，是让你用来测试你买的感受态的效率的，质粒有一定的浓度，你可以取一定量进行转化，然后根据质粒的量和长出的菌落数算出感受态的效率 X cfu。

2、起到什么作用；
就是转化的阳性对照（不是连接的阳性对照）作用，检测感受态的效率，平板的抗性，转化的过程等等

3、具体如何操作（我的连接液体系是：2.5ul solution  I+2ul 胶回收DNA+0.5ul T-vector，加到50ul感受态细胞中）
pUC 19跟你做连接没有关系
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2013-12-13 15:18:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

happy361

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
2楼说得很专业了。
赞一下 回复此楼
3楼2013-12-13 18:13:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

柠檬可乐星

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2013-12-13 15:18:13
"买了Takara的感受态，里面有一管pUC 19 plasmid "
1、它做对照的原理；
pUC 19 plasmid是附在感受态里面的，是让你用来测试你买的感受态的效率的，质粒有一定的浓度，你可以取一定量进行转化，然后根据 ...

您好！
还想问一下，第二个问题：有师兄说pUC 19 plasmid是空质粒，用来做阴性对照的，把我搞糊涂了。第三个问题：您能不能跟我说一下怎么用pUC 19做对照实验吗？
谢谢！
赞一下 回复此楼
4楼2013-12-13 18:16:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 7lpolszZVXgi 2026-08-14 6/300 2026-08-15 09:28 by sunzitan
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +24 医学老男孩 2026-08-13 50/2500 2026-08-15 06:38 by 学员8dgXkO
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 5/250 2026-08-15 04:45 by 4wMiSEwB6436
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 4/200 2026-08-15 04:17 by 4wMiSEwB6436
[找工作] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 4/200 2026-08-15 02:21 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊 +11 Tide man 2026-08-10 12/600 2026-08-15 02:12 by home3163
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 5/250 2026-08-15 00:16 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验） +6 majunge000 2026-08-11 8/400 2026-08-14 14:44 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] FileCode能看出啥？ +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 12/600 2026-08-13 23:20 by iwuli
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 确定了，国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭