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pUC 19 plasmid作对照的原理及操作
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我的PCR产物要做克隆，买了Takara的感受态，里面有一管pUC 19 plasmid，查了说明书说是做对照用的，但没写具体怎么做，对它的原理也不清楚。 所以请各位大虾指点一下，最好从pUC 19 plasmid的结构上给我说明一下：1、它做对照的原理；2、起到什么作用；3、具体如何操作（我的连接液体系是：2.5ul solution I+2ul 胶回收DNA+0.5ul T-vector，加到50ul感受态细胞中）。 本来就是做分子的新手，现又遇到各种问题，做克隆也是完全自己查资料摸索着做，没有师兄师姐带的菜鸟伤不起啊！ 求高手不吝指教！ |
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6楼2013-12-13 21:48:59
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
柠檬可乐星: 金币+5 2013-12-14 17:55:58
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"买了Takara的感受态，里面有一管pUC 19 plasmid " 1、它做对照的原理； pUC 19 plasmid是附在感受态里面的，是让你用来测试你买的感受态的效率的，质粒有一定的浓度，你可以取一定量进行转化，然后根据质粒的量和长出的菌落数算出感受态的效率 X cfu。 2、起到什么作用； 就是转化的阳性对照（不是连接的阳性对照）作用，检测感受态的效率，平板的抗性，转化的过程等等 3、具体如何操作（我的连接液体系是：2.5ul solution I+2ul 胶回收DNA+0.5ul T-vector，加到50ul感受态细胞中） pUC 19跟你做连接没有关系 |
2楼2013-12-13 15:18:13
3楼2013-12-13 18:13:13
4楼2013-12-13 18:16:00