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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 如何切开两个离得很近的内切酶位点
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yanzixiang

银虫 (小有名气)

[求助] 如何切开两个离得很近的内切酶位点

Sample TextSample Text请教大神，如何把这两个位点同时切开啊
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1楼 2013-12-06 13:24:25
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b6122

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
15楼: Originally posted by yanzixiang at 2013-12-09 06:36:03
比如我先用bam H1切一段时间，切开后Xba 1那个酶切位点上只有一对G\C可以看做是其保护碱基，但是当G\C作为xba1的保护碱基时，酶切2小时切开率也还是0%（参考NEB保护碱基表），这样能切开吗？先切Xba1也是这样。

那么能不能重新构建载体，在当前位点上做site directed mutation，插入更多的保护碱基

[ 发自小木虫客户端 ]
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16楼2013-12-10 02:41:55
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查看全部 18 个回答

yanzixiang

银虫 (小有名气)
ggatcc tctaga这两个位点之间一见碱基也没有，请问有没有方法使他们被同时切开啊，载体上只有这两个位点我的基因片段上没有，求大神指导。小弟不胜感激
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2楼2013-12-06 13:26:29
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
2楼: Originally posted by yanzixiang at 2013-12-06 13:26:29
ggatcc tctaga这两个位点之间一见碱基也没有，请问有没有方法使他们被同时切开啊，载体上只有这两个位点我的基因片段上没有，求大神指导。小弟不胜感激

你这个是BamHI和XbaI的酶切位点，按照普通的双酶切就可以，没有问题
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
3楼2013-12-06 14:30:20
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deguohan

至尊木虫 (职业作家)

教授、博/硕导

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-12-07 00:20:30
两个离得很近的内切酶位点也不影响你酶切的效果啊，直接双酶切就OK了，只要2个酶之间可以作双酶切即可！！！！！
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天道酬勤，厚德载物
4楼2013-12-06 14:54:22
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查看全部 18 个回答
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