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yanzixiang

银虫 (小有名气)

[求助] 如何切开两个离得很近的内切酶位点

Sample TextSample Text请教大神,如何把这两个位点同时切开啊
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gyesang

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【答案】应助回帖

引用回帖:
12楼: Originally posted by yanzixiang at 2013-12-09 10:34:47
能说的具体一些吗,不太懂...

1ug不算多,不行的话,可以继续降低载体的量,400ng也足够了,
顺序酶切就是先加一个酶,切2h,然后再补加另外一个酶继续切两个小时,然后跑胶回收
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
13楼2013-12-09 11:27:14
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查看全部 18 个回答

yanzixiang

银虫 (小有名气)

ggatcc tctaga这两个位点之间一见碱基也没有,请问有没有方法使他们被同时切开啊,载体上只有这两个位点我的基因片段上没有,求大神指导。小弟不胜感激
2楼2013-12-06 13:26:29
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gyesang

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【答案】应助回帖

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引用回帖:
2楼: Originally posted by yanzixiang at 2013-12-06 13:26:29
ggatcc tctaga这两个位点之间一见碱基也没有,请问有没有方法使他们被同时切开啊,载体上只有这两个位点我的基因片段上没有,求大神指导。小弟不胜感激

你这个是BamHI和XbaI的酶切位点,按照普通的双酶切就可以,没有问题
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
3楼2013-12-06 14:30:20
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deguohan

至尊木虫 (职业作家)

教授、博/硕导

【答案】应助回帖

★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-12-07 00:20:30
两个离得很近的内切酶位点也不影响你酶切的效果啊,直接双酶切就OK了,只要2个酶之间可以作双酶切即可!!!!!
天道酬勤,厚德载物
4楼2013-12-06 14:54:22
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