| 查看: 1746 | 回复: 6 | ||
zhaozhibozhi金虫 (正式写手)
|
[求助]
细菌基因突变体功能补偿
|
|
请教一个实验问题。 最近敲出了Pseudomonas syringe菌株的一个基因，产生了某些表型变化，想做突变体功能补偿。 请问是否可以把基因的ORF连到带有启动子（如tac promoter）的载体上？如果可以，带有融合标签的表达载体pMEKm12可以用吗？ 或者，需要把基因的ORF连同自身启动子一块连到载体上？如果是这样，有哪些载体可以使用呢? 诚谢！！！ |
回复此楼» 猜你喜欢
336求调剂
已经有5人回复
-
277材料科学与工程080500求调剂
已经有6人回复
-
333求调剂
已经有4人回复
-
286求调剂
已经有8人回复
-
298求调剂
已经有4人回复
-
306求0703调剂一志愿华中师范
已经有5人回复
-
299求调剂
已经有7人回复
-
26考研一志愿中国石油大学(华东)305分求调剂
已经有6人回复
-
初试 317
已经有5人回复
-
296求调剂
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 基因敲除后，鉴定突变体引物如何设计
已经有4人回复
咆哮的白菜
金虫 (正式写手)
- 应助: 12 (小学生)
- 金币: 4800.7
- 散金: 680
- 帖子: 602
- 在线: 122.5小时
- 虫号: 1074287
- 注册: 2010-08-13
- 性别: GG
- 专业: 植物病理学
2楼2013-12-07 17:08:17
quiller2000
木虫 (著名写手)
- MicEPI: 3
- 应助: 160 (高中生)
- 贵宾: 0.114
- 金币: 2752.9
- 散金: 50
- 红花: 26
- 帖子: 1168
- 在线: 167.3小时
- 虫号: 895537
- 注册: 2009-11-06
- 性别: GG
- 专业: 微生物资源与分类学
3楼2013-12-07 19:11:10
zhaozhibozhi
金虫 (正式写手)
- 应助: 112 (高中生)
- 金币: 1512.3
- 散金: 5
- 红花: 11
- 帖子: 480
- 在线: 444.9小时
- 虫号: 1763195
- 注册: 2012-04-18
- 性别: GG
- 专业: 植物病理学
4楼2013-12-07 20:31:24
zhaozhibozhi
金虫 (正式写手)
- 应助: 112 (高中生)
- 金币: 1512.3
- 散金: 5
- 红花: 11
- 帖子: 480
- 在线: 444.9小时
- 虫号: 1763195
- 注册: 2012-04-18
- 性别: GG
- 专业: 植物病理学
5楼2013-12-07 20:34:10
咆哮的白菜
金虫 (正式写手)
- 应助: 12 (小学生)
- 金币: 4800.7
- 散金: 680
- 帖子: 602
- 在线: 122.5小时
- 虫号: 1074287
- 注册: 2010-08-13
- 性别: GG
- 专业: 植物病理学
|
用所谓的native promoter是最好的，既然有人在此菌株中用过这个启动子做过过表达实验，说明这是一个强启动子，强启动子的特点应该是所有时间段或生长阶段的强力且持续的表达，做功能补偿应该是可以。但是为什么native的更好，是因为native promoter并不一定是个强启动子，它可能会在不同的时间有不同的表达量，这种情况是和敲掉以前的基因表达基本一致的，基本不会有其他影响；如果你用外源的强启动子，补偿的基因持续表达，相对于原始的基因表达水平就会有差异，比如在X时期，原始基因是没有表达的而外源启动子却还是一直表达，所以有了差异可能就会有其他影响，native promoter就没这个问题了。 |
6楼2013-12-08 12:55:06
zhaozhibozhi
金虫 (正式写手)
- 应助: 112 (高中生)
- 金币: 1512.3
- 散金: 5
- 红花: 11
- 帖子: 480
- 在线: 444.9小时
- 虫号: 1763195
- 注册: 2012-04-18
- 性别: GG
- 专业: 植物病理学
7楼2013-12-08 13:10:33
