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HPLC方法测量拟南芥幼苗ABA遇到的问题
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诸位大侠： 最近我在提取测量5天的拟南芥幼苗中的ABA，提取方法大致就是用80%的甲醇（含有10mg/L的抗氧剂）直接研磨0.5或1g的材料，提取液和研钵都预冷了。大约用了10ml的浸提液，第一次直接放在4度冰箱里过夜，也试过用超声波超声30min后再放到冰箱里。过夜后离心收集上清液。之后的纯化方法各种都试过，最近一次没有做纯化，直接上冷冻干燥机蒸干，用流动相（v甲醇：v水（含1%乙酸）=4:6）复溶，上HPLC测量。提取了三次，测了三次，每次标准品都有单一的峰大约17分钟多点，样品有杂峰，可就是在14分钟后再也没峰了，不知道哪出问题了。 想请教各位做过的，在提取的时候有什么需要注意的细节问题，比如研磨的时候需要弱光？4度浸提的时候需要一直摇晃？如果不做纯化，蒸干后直接做HPLC，如果有ABA，其他杂质应该不会干扰吧。 还想请教各位，现在想发表好点的SCI文章，测ABA比较好的方法包括Elisa方法吗？谢谢！ |
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