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永远一片天

新虫 (正式写手)

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专业: 药理学其他科学问题

[求助] 将细菌放在0.8%氯化钠溶液中70度的目的是什么？

2、肺炎链球菌的培养物的提取
提取开始前，请准备：
37℃恒温水浴或金属浴。
70℃恒温水浴或金属浴。
100℃恒温水浴或金属浴。
TE缓冲液（ph8.0)
提取步骤：
1、在1.5ml离心管底部加入300μl 0.85%NaCl溶液。
2、刮取1取菌环新鲜培养的细菌于上述溶液中。
3、混合液于70℃环境，恒温孵育至少20min。（5-10%的氯化钠溶液可抑制普通细菌的生长）
4、13000rpm离心2min，弃去上清。
5、加入80μl TE缓冲液重悬菌体。
6、加入10μl变溶菌素溶液（mutanolysin，3000U/ml），混匀。
7、混合液于37℃环境，恒温孵育至少60min。
8、混合液于100℃环境，灭活10min。
9、13000rpm离心2min，上清备用。
10、在离心管侧壁标记处标记菌株编号和提取时间；在离心管盖顶部标记菌株编号。冷冻保存备用。

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