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永远一片天

新虫 (正式写手)

[求助] 将细菌放在0.8%氯化钠溶液中70度的目的是什么?

2、肺炎链球菌的培养物的提取
提取开始前,请准备:
37℃恒温水浴或金属浴。 
70℃恒温水浴或金属浴。 
100℃恒温水浴或金属浴。 
TE缓冲液(ph8.0)
提取步骤:
1、在1.5ml离心管底部加入300μl 0.85%NaCl溶液。 
2、刮取1取菌环新鲜培养的细菌于上述溶液中。 
3、混合液于70℃环境,恒温孵育至少20min。 (5-10%的氯化钠溶液可抑制普通细菌的生长)
4、13000rpm离心2min,弃去上清。 
5、加入80μl TE缓冲液重悬菌体。 
6、加入10μl变溶菌素溶液(mutanolysin,3000U/ml),混匀。 
7、混合液于37℃环境,恒温孵育至少60min。 
8、混合液于100℃环境,灭活10min。 
9、13000rpm离心2min,上清备用。 
10、在离心管侧壁标记处标记菌株编号和提取时间;在离心管盖顶部标记菌株编号。冷冻保存备用。 
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