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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » DGGE的电压与电流应该设多少？
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donggualily

金虫 (正式写手)

[求助] DGGE的电压与电流应该设多少？ 已有2人参与

我是DGGE新手，按前辈们的建议，跑了个低电压长时间的DGGE电泳，目的序列470bp，75V，16h，40%-60%的变性梯度（做过垂直胶的梯度优化），胶浓度8%。可是等到电泳结束后染色才发现，大部分条带跑出去了，剩在胶里的条带也没有弯曲变形什么的，只不过所剩无几了，于是胶上半部分空白。求助各位高手，为何这么低的电压，16个小时还是跑出胶？是不是电流太大？电流应该多大才合适?如何改进实验呢？另外，请教470bp的序列应该是用8%的胶浓度还是6%?万分感谢！
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1楼 2013-12-03 19:21:31
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donggualily

金虫 (正式写手)
高手在哪里啊？自己顶！
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2楼2013-12-04 15:52:23
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yht5657

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-01-11 23:37:03
donggualily: 金币+3, ★★★很有帮助, 谢谢应助！ 2014-01-17 12:39:13
电压乘以电泳时间（h）的乘积等于1000是最好的。
6% ------300~1000bp
8%-------200~400bp
10%-----100~300bp
所以200~400bp的三个都试试，大于400bp的估计先试试6%的吧。
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付出才有可能有回报。
3楼2014-01-11 10:22:01
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ppdgge

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by yht5657 at 2014-01-11 10:22:01
电压乘以电泳时间（h）的乘积等于1000是最好的。
6% ------300~1000bp
8%-------200~400bp
10%-----100~300bp
所以200~400bp的三个都试试，大于400bp的估计先试试6%的吧。

你这8%  10% 什么意思？
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4楼2014-04-01 23:05:34
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yht5657

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by ppdgge at 2014-04-01 23:05:34
你这8%  10% 什么意思？...

胶浓度8%
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付出才有可能有回报。
5楼2014-04-02 08:45:05
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风铃永不孤单

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

会不会是电压过大了~~~~把电压调低一点，再试一下吧~
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6楼2015-11-22 10:11:10
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