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406587521

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
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虫号: 1717486
注册: 2012-03-26
专业: 植物化学保护

[求助] 有个PCR程序不大懂求师兄师姐帮我看看呜呜金币不多，但诚心求教！

要做分子标记的试验，用RGA标记DNA，文献上的PCR程序不太明白，不知道怎么设置这个程序，求师兄师姐帮忙解答一下！谢谢！PCR程序原文如下：“AmpliTcation was carried out ina Perkin-Elmer model 480 thermal cycler programmed for 5 min at 94C for initial denaturation and 45 cycles consisting of 1 min at 94C, 1 min at 45C, and 2 min at 72C, followed by a final 7-min extension at 72C. A 2.5-min ramp time was used between the 94C denaturation and the 45C annealing steps; the fastest possible ramp for all other temperature transitions used. ”主要是“A 2.5-min ramp time was used between the 94°C denaturation and the 45°C annealing steps. The fastest possible ramp was employed for all other temperature transitions.”这句看不懂，不知道怎么设置。

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1楼2013-11-27 22:20:01

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看海的snoopy

金虫 (正式写手)

应助: 8 (幼儿园)
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在线: 24.8小时
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注册: 2012-11-14
性别: GG
专业: 生物化学

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-11-29 14:42:18
406587521: 金币+30, ★★★很有帮助, 设好了大概是94c-45c=49c 49c/2.5min=0.3c/s 2013-11-29 16:23:53

就是一个斜率问题，简单地说是调节升降温的速率，使得升降温的速度变慢，以便符合上述文献中的要求，具体的设置就需要你去查看那台一起的说明书了，网上有下载的。大概斜率的百分比和时间的长短都会有一个详细的说明。希望能帮到你。