24小时热门版块排行榜    

查看: 2841  |  回复: 19
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

流连客

新虫 (初入文坛)

[求助] 安捷伦XDB-C18柱似乎堵了,诚心求助HPLC高手,急! 已有3人参与

楼主是植物学专业小硕,从未接触过HPLC。实验后期需要测异黄酮类物质,样品是大豆叶片甲醇提取液,0.22um滤膜过滤后上HPLC分析。HPLC连续分析4天后23min处出现压力上升和杂峰(如图,下图压力开始不稳)。后面跑了甲醇空白溶液,23min处依旧有峰,得出结论是色谱柱出了问题,色谱柱前加了预柱,预柱取下后有黑色小颗粒,不清楚是什么。用100%乙腈冲了几个小时后稍微好一些,现在换用100%甲醇冲洗。梯度洗脱中流动相A是0.2%乙酸(pH=3.03),流动相B是100%乙腈,柱子是安捷伦的反相色谱柱XDB-C18。求HPLC高手指导如何处理此种情况,谢谢!
安捷伦XDB-C18柱似乎堵了,诚心求助HPLC高手,急!
HPLC问题图.png
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

饿到天明

金虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 流连客 at 2013-11-26 09:38:17
您的意思是,倒接柱子后峰正常才能完全说明压力基线问题源于柱子污染,否则还存在其他情况?如果峰依旧不正常,有可能是什么原因?谢谢!...

如果倒接还不正常的话,问题可能出在仪器上面了。一般柱效下降,柱子污染,柱头塌陷等症状,倒接柱子都能缓解一段时间。
9楼2013-11-26 10:04:22
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 20 个回答

金城小学生

木虫 (著名写手)

小木虫

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
费姚永芬: 金币+2, 谢谢交流,欢迎常来分析版 2013-11-25 22:03:41
流连客: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-05-06 19:26:09
如果预柱有污染或堵塞,那可以推断色谱住受污染了,将柱子拆下,进行再生处理,将连接检测器端口断开,温度升高到300℃左右进行再生8到10小时,情况应该会好转,如果不行就只能换色谱住,如需再生细节可以在联系,希望可以帮到你。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
勇者不惧、知者不惑、仁者不忧。
2楼2013-11-25 17:33:42
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

流连客

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 金城小学生 at 2013-11-25 17:33:42
如果预柱有污染或堵塞,那可以推断色谱住受污染了,将柱子拆下,进行再生处理,将连接检测器端口断开,温度升高到300℃左右进行再生8到10小时,情况应该会好转,如果不行就只能换色谱住,如需再生细节可以在联系,希 ...

查到的色谱柱再生方法是:
反相柱
   分别用甲醇:水=90:10、纯甲醇、二氯甲烷等溶剂着流动相,依次冲洗,每种流动相流经色谱柱不少于20倍的色谱柱体积。然后再以相反的次序冲洗。
我目前用100%甲醇在低速冲洗,柱压有所下降。XDB的柱子最高耐受60℃,您说的300℃是指什么????
3楼2013-11-25 19:34:44
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
费姚永芬: 金币+1, 晚上好,谢谢 2013-11-25 22:04:03
流连客: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-05-06 19:25:57
很显然是色谱柱污染所致,可以按照上述你查到的方法再生,但是不建议使用二氯甲烷,可用异丙醇代替。还有就是楼上说的可能是30℃,不是300
4楼2013-11-25 21:40:56
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 285求调剂 +3 满头大汗的学生 2026-02-28 3/150 2026-02-28 16:22 by 无际的草原
[考研] 265分求调剂不调专业和学校有行学上就 +4 礼堂丁真258 2026-02-28 6/300 2026-02-28 16:18 by 求调剂zz
[考研] 312求调剂 +4 吃宵夜1 2026-02-28 5/250 2026-02-28 16:11 by gjm133
[考博] 26申博 +3 想申博! 2026-02-26 3/150 2026-02-28 16:07 by nxgogo
[考研] 材料类求调剂 +3 wana_kiko 2026-02-28 3/150 2026-02-28 15:03 by lature00
[考研] 295求调剂 +4 19171856320 2026-02-28 4/200 2026-02-28 13:39 by ms629
[考研] 290求调剂 +4 材料专硕调剂; 2026-02-28 5/250 2026-02-28 13:32 by houyaoxu
[考研] 0856调剂 +3 刘梦微 2026-02-28 3/150 2026-02-28 13:22 by houyaoxu
[考研] 寻找调剂 +3 LYidhsjabdj 2026-02-28 3/150 2026-02-28 12:59 by miniwendy
[考研] 304求调剂 +5 曼殊2266 2026-02-28 6/300 2026-02-28 12:44 by 迷糊CCPs
[考研] 0856材料求调剂 +7 hyf hyf hyf 2026-02-28 8/400 2026-02-28 12:36 by 52hz~~
[硕博家园] 博士自荐 +6 科研狗111 2026-02-26 9/450 2026-02-28 12:32 by seaskyy
[考研] 272求调剂 +3 田智友 2026-02-28 3/150 2026-02-28 12:31 by 王加浩to
[考研] 298求调剂 +4 axyz3 2026-02-28 4/200 2026-02-28 11:21 by wang_dand
[考研] 280求调剂 +6 Qq206./ 2026-02-21 6/300 2026-02-28 11:20 by 我!要一战成硕
[考博] 博士推荐 +3 花儿笑? 2026-02-21 4/200 2026-02-27 18:30 by 黑!在干嘛
[基金申请] 什么是人一生最重要的? +10 瞬息宇宙 2026-02-21 10/500 2026-02-27 08:46 by tfang
[基金申请] 面上可以超过30页吧? +12 阿拉贡aragon 2026-02-22 13/650 2026-02-26 22:09 by Hahaxia
[教师之家] 版面费该交吗 +14 苹果在哪里 2026-02-22 17/850 2026-02-26 11:55 by AGI智创机器人
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
请填处理意见