24小时热门版块排行榜    

查看: 3311  |  回复: 19
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

流连客

新虫 (初入文坛)

[求助] 安捷伦XDB-C18柱似乎堵了,诚心求助HPLC高手,急! 已有3人参与

楼主是植物学专业小硕,从未接触过HPLC。实验后期需要测异黄酮类物质,样品是大豆叶片甲醇提取液,0.22um滤膜过滤后上HPLC分析。HPLC连续分析4天后23min处出现压力上升和杂峰(如图,下图压力开始不稳)。后面跑了甲醇空白溶液,23min处依旧有峰,得出结论是色谱柱出了问题,色谱柱前加了预柱,预柱取下后有黑色小颗粒,不清楚是什么。用100%乙腈冲了几个小时后稍微好一些,现在换用100%甲醇冲洗。梯度洗脱中流动相A是0.2%乙酸(pH=3.03),流动相B是100%乙腈,柱子是安捷伦的反相色谱柱XDB-C18。求HPLC高手指导如何处理此种情况,谢谢!
安捷伦XDB-C18柱似乎堵了,诚心求助HPLC高手,急!
HPLC问题图.png
回复此楼
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
费姚永芬: 金币+1, 晚上好,谢谢 2013-11-25 22:04:03
流连客: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-05-06 19:25:57
很显然是色谱柱污染所致,可以按照上述你查到的方法再生,但是不建议使用二氯甲烷,可用异丙醇代替。还有就是楼上说的可能是30℃,不是300
4楼2013-11-25 21:40:56
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 20 个回答

金城小学生

木虫 (著名写手)

小木虫

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
费姚永芬: 金币+2, 谢谢交流,欢迎常来分析版 2013-11-25 22:03:41
流连客: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-05-06 19:26:09
如果预柱有污染或堵塞,那可以推断色谱住受污染了,将柱子拆下,进行再生处理,将连接检测器端口断开,温度升高到300℃左右进行再生8到10小时,情况应该会好转,如果不行就只能换色谱住,如需再生细节可以在联系,希望可以帮到你。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
勇者不惧、知者不惑、仁者不忧。
2楼2013-11-25 17:33:42
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

流连客

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 金城小学生 at 2013-11-25 17:33:42
如果预柱有污染或堵塞,那可以推断色谱住受污染了,将柱子拆下,进行再生处理,将连接检测器端口断开,温度升高到300℃左右进行再生8到10小时,情况应该会好转,如果不行就只能换色谱住,如需再生细节可以在联系,希 ...

查到的色谱柱再生方法是:
反相柱
   分别用甲醇:水=90:10、纯甲醇、二氯甲烷等溶剂着流动相,依次冲洗,每种流动相流经色谱柱不少于20倍的色谱柱体积。然后再以相反的次序冲洗。
我目前用100%甲醇在低速冲洗,柱压有所下降。XDB的柱子最高耐受60℃,您说的300℃是指什么????
3楼2013-11-25 19:34:44
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

流连客

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by wyy080214 at 2013-11-25 21:40:56
很显然是色谱柱污染所致,可以按照上述你查到的方法再生,但是不建议使用二氯甲烷,可用异丙醇代替。还有就是楼上说的可能是30℃,不是300

非常感谢!
5楼2013-11-25 23:01:21
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 科研孤儿太难了 +17 我4大白菜 2026-08-20 18/900 2026-08-21 20:57 by zhangev
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 14/700 2026-08-21 16:51 by applepetty
[基金申请] 让我中一个面上吧! +11 大萍1987 2026-08-20 13/650 2026-08-21 14:48 by 20120902066
[基金申请] 人气不行了 +7 fansofjerry 2026-08-21 7/350 2026-08-21 14:13 by Vivilian
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +23 yaoyewhu2008 2026-08-20 25/1250 2026-08-21 12:19 by Poppy1104
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +15 archvillain 2026-08-15 27/1350 2026-08-21 11:32 by tim76
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +15 kkkl_v 2026-08-19 16/800 2026-08-21 11:22 by 365372687
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 13/650 2026-08-21 08:30 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
信息提示
请填处理意见