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shccms

银虫 (小有名气)

[求助] 观察囊泡形貌，冷冻切片机切片tem观察和冷冻蚀刻tem（cyro-tem）是一回事吗

学校有冷冻切片机，但是一般文献观察囊泡用的是cyro-tem，这两者是一回事吗？
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1楼 2013-11-22 15:53:26
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qinhaili

金虫 (正式写手)
哪个学校的，我正在找冷冻切片机，想联系制个样品
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2楼2013-12-04 14:06:10
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gxytju2008

专家顾问 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
shccms: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-12-05 16:09:09
shccms: 金币+6, ★★★很有帮助, 剩余bb散出去。 2013-12-05 16:31:30
一般的冷冻切片貌似不行，要超薄冷冻切片的，而且是用液氮液氦冷冻的那种，100nm以下厚度，cryo-TEM就是一种方法，在观测的时候用液氮冷冻，可以直接观测培养液或者冷冻切片样品，跟你样品咋切的还是滴的没关系
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3楼2013-12-04 16:01:22
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papaverme

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
shccms: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-12-05 16:10:11
冷冻切片是一种电镜制样方法，对于较软的材料，例如橡胶，冷冻到较低的温度再切成100nm以下的薄片转移到铜网上，回复到室温后干燥，再供电镜观察。观察过程中通常不冷冻样品。

cyro-tem是冷冻透射电镜。完整的cyro-tem方法通常是在电镜制样时就开始冷冻样品，例如将蘸在铜网上的样品溶液或分散液的液膜急速冷冻，即在铜网上形成玻璃态（无定形的固态）水膜，然后在样品传输、进样、TEM观察的过程中始终保持低温。对于电镜的配置和参数也都有相应的要求。对于囊泡类样品的观察，通常指的就是这种方法。
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4楼2013-12-04 17:52:12
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papaverme

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by qinhaili at 2013-12-04 14:06:10
哪个学校的，我正在找冷冻切片机，想联系制个样品

大部分有冷冻切片的地方都不怎么对外做。一方面，冷冻切片耗时较长，通常自己单位的样品就很容易把机时占满了；另一方面，因为冷冻切片实在是个高技术含量的工作，尤其对于陌生样品，需要较长时间摸索条件。一般都不愿意费这个事。
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5楼2013-12-04 17:57:55
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shccms

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by gxytju2008 at 2013-12-04 16:01:22
一般的冷冻切片貌似不行，要超薄冷冻切片的，而且是用液氮液氦冷冻的那种，100nm以下厚度，cryo-TEM就是一种方法，在观测的时候用液氮冷冻，可以直接观测培养液或者冷冻切片样品，跟你样品咋切的还是滴的没关系

学校的是超薄冷冻切片，不过好像很多都用来看组织切片的。不知道能不能用来看囊泡
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6楼2013-12-05 16:14:09
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gxytju2008

专家顾问 (文坛精英)
引用回帖:
6楼: Originally posted by shccms at 2013-12-05 16:14:09
学校的是超薄冷冻切片，不过好像很多都用来看组织切片的。不知道能不能用来看囊泡...

应该可以的。。但是能不能做好，需要多长时间摸索。。很难说，这是个技术活
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7楼2013-12-05 16:22:34
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