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依利特C18色谱柱问题
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| 本人最近在使用依利特C18ODS 5微米的色谱柱用于分析 头孢类物质。 分析的样品里有头孢氨苄、7-ADCA、苯甘氨酸甲酯、苯甘氨酸四种物质。 流动相使用10mMPH7.0的磷酸盐缓冲液70%：甲醇30% 这样分析使用会出现问题？ 刚开始峰形很好，但是打了几次就出现了肩峰。我怀疑可能是样品没有过膜。柱子是新买的。 无奈之下，我只能反向使用柱子，并且样品都过膜，刚开始使用峰形很好，但是今天使用流动相时，每进一针样品，柱压就升高一点，最后柱压达到了190bar，，，，之后用10%甲醇洗的时候柱压上升到250，后面逐渐降低到160，求解释原因，是柱子不适合分析我这个样品还是流动相不行？？？或者是前面没有过膜的样品污染了柱子，反向打和洗的时候再次污染了？？？？ 求解释。。。。 |
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