24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 700  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

l刘莉娜

新虫 (小有名气)

[交流] 重叠pcR 已有2人参与

我想把大小为11kb的基因片段和大小为3kb的基因片段用重叠pcR连到一起,但不知道能不能行得通,请各位虫友指导一下,非常感谢!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liygmail

至尊木虫 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by l刘莉娜 at 2013-12-03 15:55:04
你好,我的内置引物有50bp.可是我现在用Overlap怎么也p不出来,该怎么办?...

内置引物有50bp,可是这两条引物间重叠区究竟是多少呢?请检查一下,
此外需注意的是,扩增14kb的长片段,应该选用适合的酶
建立重叠pcr反应体系时,作为模板的11kb和3kb的两个片段应该摩尔比保持1:1,总量100ng/50ul,以上
6楼2013-12-04 11:33:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
丝毫没有问题,就普通的overlap PCR就可以达到你的目的
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2013-11-16 23:32:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liygmail

至尊木虫 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可行,在设计引物时,注意两片段,内引物重叠区25碱基以上,
3楼2013-11-17 00:30:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

l刘莉娜

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2013-11-16 23:32:35
丝毫没有问题,就普通的overlap PCR就可以达到你的目的

你好,我现在用Overlap怎么也p不出来,该怎么办?内置引物有50bp.
4楼2013-12-03 15:54:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料科学与工程求调剂 +5 深V宿舍吧 2026-03-29 5/250 2026-03-29 19:10 by 学员8dgXkO
[考研] 329求调剂,一志愿西北工业大学,材料工程(085601) +4 小小机灵虫 2026-03-29 10/500 2026-03-29 18:20 by 无际的草原
[考研] 348求调剂 +5 小懒虫不懒了 2026-03-28 5/250 2026-03-29 10:34 by 唐沐儿
[考研] 材料学硕333求调剂 +11 北道巷 2026-03-24 11/550 2026-03-29 08:31 by fmesaito
[考研] 305求调剂 +8 RuiFairyrui 2026-03-28 8/400 2026-03-29 08:22 by fmesaito
[考研] 一志愿太原理工安全工程300分,求调剂 +5 0857求调剂. 2026-03-24 6/300 2026-03-28 22:04 by zhq0425
[考研] 求调剂 +6 芦lty 2026-03-25 7/350 2026-03-28 13:13 by 唐沐儿
[考研] 0856,材料与化工321分求调剂 +12 大馋小子 2026-03-27 13/650 2026-03-28 10:56 by self2008
[考研] 339求调剂,想调回江苏 +6 烤麦芽 2026-03-27 8/400 2026-03-28 10:40 by 烤麦芽
[考研] 材料求调剂一志愿哈工大324 +7 闫旭东 2026-03-28 9/450 2026-03-28 08:51 by Xu de nuo
[考研] 张芳铭-中国农业大学-环境工程专硕-298 +4 手机用户 2026-03-26 4/200 2026-03-28 07:17 by mmm just
[有机交流] 高温高压反应求助 10+4 chibby 2026-03-25 4/200 2026-03-27 21:08 by BT20230424
[考研] 一志愿211院校 344分 东北农业大学生物学学硕,求调剂 +5 丶风雪夜归人丶 2026-03-26 8/400 2026-03-27 19:22 by 丶风雪夜归人丶
[考研] 316求调剂 +5 Pigcasso 2026-03-24 5/250 2026-03-27 12:10 by zhshch
[考研] 314求调剂 +3 溪云珂 2026-03-26 3/150 2026-03-27 11:20 by sanrepian
[考研] 0703化学一志愿南京师范大学303求调剂 +3 zzffylgg 2026-03-24 3/150 2026-03-27 10:42 by shangxh
[考研] 351求调剂 +4 麦克阿磊 2026-03-24 4/200 2026-03-27 00:32 by wxiongid
[考研] 中国科学院深圳先进技术研究院-光纤传感课题组招生-中国科学院大学、深圳理工大学联培 +5 YangTyu1 2026-03-26 5/250 2026-03-26 18:27 by 猫咪猫咪呀
[考研] 334分 一志愿武理-080500 材料求调剂 +4 李李不服输 2026-03-25 4/200 2026-03-25 21:26 by 星空星月
[考研] 调剂 +4 13853210211 2026-03-24 4/200 2026-03-24 19:44 by ms629
信息提示
请填处理意见