应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 重叠pcR
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
71/1返回列表
查看: 702  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

l刘莉娜

新虫 (小有名气)

[交流] 重叠pcR 已有2人参与

我想把大小为11kb的基因片段和大小为3kb的基因片段用重叠pcR连到一起，但不知道能不能行得通，请各位虫友指导一下，非常感谢！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2013-11-16 19:02:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
丝毫没有问题，就普通的overlap PCR就可以达到你的目的
赞一下(1人) 回复此楼
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2013-11-16 23:32:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liygmail

至尊木虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可行，在设计引物时，注意两片段，内引物重叠区25碱基以上，
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2013-11-17 00:30:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

l刘莉娜

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2013-11-16 23:32:35
丝毫没有问题，就普通的overlap PCR就可以达到你的目的

你好，我现在用Overlap怎么也p不出来，该怎么办？内置引物有50bp.
赞一下 回复此楼
4楼2013-12-03 15:54:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

l刘莉娜

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by liygmail at 2013-11-17 00:30:09
可行，在设计引物时，注意两片段，内引物重叠区25碱基以上，

你好，我的内置引物有50bp.可是我现在用Overlap怎么也p不出来，该怎么办？
赞一下 回复此楼
5楼2013-12-03 15:55:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liygmail

至尊木虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by l刘莉娜 at 2013-12-03 15:55:04
你好，我的内置引物有50bp.可是我现在用Overlap怎么也p不出来，该怎么办？...

内置引物有50bp，可是这两条引物间重叠区究竟是多少呢？请检查一下，
此外需注意的是，扩增14kb的长片段，应该选用适合的酶
建立重叠pcr反应体系时，作为模板的11kb和3kb的两个片段应该摩尔比保持1:1，总量100ng/50ul,以上
赞一下 回复此楼
6楼2013-12-04 11:33:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

l刘莉娜

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by liygmail at 2013-12-04 11:33:53
内置引物有50bp，可是这两条引物间重叠区究竟是多少呢？请检查一下，
此外需注意的是，扩增14kb的长片段，应该选用适合的酶
建立重叠pcr反应体系时，作为模板的11kb和3kb的两个片段应该摩尔比保持1:1，总量100ng ...

我的重叠部分引物互补部分有49bp,11kb的片段之前我用pushion酶没有p出来，有primerstar酶p出来了，但是现在overlap用这两个酶都p不出来，非常着急！
赞一下 回复此楼
7楼2013-12-04 14:45:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 l刘莉娜 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085600 286分 材料求调剂 +10 麻辣鱿鱼 2026-03-27 11/550 2026-03-29 21:52 by nanaliuyun
[考研] 求调剂 +4 QiMing7 2026-03-25 5/250 2026-03-29 21:10 by 唐沐儿
[考研] 求调剂 +4 青春裁为三截 2026-03-29 4/200 2026-03-29 15:01 by 唐沐儿
[考研] 22408 359分调剂 +4 Qshers 2026-03-27 6/300 2026-03-29 14:16 by Qshers
[考研] 340求调剂 +6 Amber00 2026-03-26 6/300 2026-03-29 12:06 by 无际的草原
[考研] 求调剂，一志愿 南京航空航天大学 ，080500材料科学与工程学硕，总分289分 +7 @taotao 2026-03-29 7/350 2026-03-29 12:03 by longlotian
[考研] 321求调剂 +7 璞玉~~ 2026-03-25 8/400 2026-03-29 06:41 by 544594351
[考研] 085701求调剂初试286分 +4 secret0328 2026-03-28 4/200 2026-03-28 21:09 by 15366876211
[考研] 085602 307分 求调剂 +7 不知道叫什么！ 2026-03-26 7/350 2026-03-28 09:57 by 神马都不懂
[考研] 一志愿南昌大学324求调剂 +7 hanamiko 2026-03-27 7/350 2026-03-28 09:56 by 李上岸0921
[考研] 291求调剂 +6 HanBeiNingZC 2026-03-24 6/300 2026-03-28 07:55 by baoball
[考研] 085601 材料工程 313分 求调剂 +5 Ong3 2026-03-27 5/250 2026-03-27 12:24 by goldfish51
[考研] 314求调剂 +3 溪云珂 2026-03-26 3/150 2026-03-27 11:20 by sanrepian
[考研] 求调剂323材料与化工 +7 1124361 2026-03-24 7/350 2026-03-27 10:22 by wangjy2002
[考研] 343求调剂 +4 赠我一本书 2026-03-23 4/200 2026-03-27 00:40 by wxiongid
[考研] 求调剂 一志愿 本科 北科大 化学 343 +6 13831862839 2026-03-24 7/350 2026-03-26 22:57 by 不吃魚的貓
[考研] 环境专硕324分求调剂推荐 +5 轩小宁—— 2026-03-26 5/250 2026-03-26 12:05 by i_cooler
[考研] 材料专硕 335 分求调剂 +4 拒绝冷暴力 2026-03-25 4/200 2026-03-25 18:45 by haxia
[有机交流] 有机合成求助 20+3 FENGSHUJEI 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:31 by 88817753
[论文投稿] 急发核心期刊论文 +3 贤达问津 2026-03-23 5/250 2026-03-23 17:13 by 妹子不好惹
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭