应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » Southren杂交 酶切、探针的设计
61/1返回列表
查看: 1143  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

guaiyaya

铜虫 (初入文坛)

[求助] Southren杂交 酶切、探针的设计

请教各位高手：
敲掉了一个基因，接下来要做个Southren杂交检测，不知道探针是怎么设计的？是在野生型上设计还是在突变体上设计呢？如果在野生型上设计是设计在被敲掉的部分吗？还是设计在野生型的同源臂上呢？
另外，酶切有什么要求呢？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-11-12 15:07:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)
楼主是想检测突变体中的插入拷贝数，还是想确定一下突变体中该基因丢失？
赞一下 回复此楼
jiayoubashaonian
2楼2013-11-12 16:05:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guaiyaya

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by blackrose8089 at 2013-11-12 16:05:54
楼主是想检测突变体中的插入拷贝数，还是想确定一下突变体中该基因丢失？

已经确定是单拷贝，只是确定突变体中该基因的丢失
赞一下 回复此楼
3楼2013-11-13 08:49:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)
是在野生型上被敲掉的部分设计吧
赞一下 回复此楼
jiayoubashaonian
4楼2013-11-13 08:52:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huahu3600

新虫 (小有名气)
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-11-14 10:24:43
探针设计在同源臂外，根据条带大小来判定野生型还是重组型。
但是，要选择合适的内切酶，也就是说你选择的酶，野生型与重组型会有不同的条带产生。
这样，能证明同源重组，进而排除掉随机插入的情况。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2013-11-13 12:25:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guaiyaya

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by huahu3600 at 2013-11-13 12:25:28
探针设计在同源臂外，根据条带大小来判定野生型还是重组型。
但是，要选择合适的内切酶，也就是说你选择的酶，野生型与重组型会有不同的条带产生。
这样，能证明同源重组，进而排除掉随机插入的情况。

谢谢你的回答。。。
回复此楼
6楼2013-11-14 08:18:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 guaiyaya 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +6 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 7/350 2026-08-30 17:03 by hZiFeudZyoGR
[基金申请] 能否申诉？ +4 echo8914667 2026-08-30 4/200 2026-08-30 16:03 by sundiv
[找工作] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 8/400 2026-08-30 12:14 by l0VvVHGBGRLv
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 8/400 2026-08-30 12:02 by l0VvVHGBGRLv
[公派出国] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +6 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 8/400 2026-08-30 11:32 by l0VvVHGBGRLv
[考博] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 6/300 2026-08-30 11:10 by l0VvVHGBGRLv
[基金申请] 29号明天会评吗 +3 笨笨唐 2026-08-28 3/150 2026-08-30 09:29 by cww8181
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已，这评审意见是按照杰青的条件评的吧？ +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 4/200 2026-08-30 07:28 by ZPa0EcMwuECS
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 4/200 2026-08-30 06:57 by ZPa0EcMwuECS
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 6/300 2026-08-30 01:58 by ZPa0EcMwuECS
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 为什么到现在没收到通知？ +4 tannykie 2026-08-29 4/200 2026-08-29 17:14 by lmz0216
[教师之家] 导师吐槽：我怎么摊上了这么个极品研究生！ +9 苏东坡二世 2026-08-23 9/450 2026-08-29 14:41 by hustersqt
[基金申请] 申请删除本帖 +6 lyz123lyz 2026-08-27 7/350 2026-08-27 17:31 by 宁静致远sy
[基金申请] 基金未中，这种答复是模板吗？ +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭