| 查看: 1765 | 回复: 7 | ||
芳芳在考研银虫 (小有名气)
|
[求助]
反向PCR遇到的问题 求大神大牛们的指点！
|
|
反向pcr做了两个月，实验步骤，提基因组，酶切消化，T4连接，纯化产物，PCR，之前p出来都是糊带，最近发现T4连接后浓度就已经变得很低很低，几乎没有，纯化后就更少了。200微升连接体系。用的Sau3A1酶切，37度过夜，连接是16度，至少五个小时。十个小时的也连过，但是都是一样的浓度低。酶切的时候是取的10微升DNA去切，50微升体系，过夜后65度灭活20分钟，然后连接，取的是12.5微升酶切产物。 希望得到各位的指点，实验新手急需帮助啊！  |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有113人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 有没有做反向PCR的朋友？ ！！！
已经有4人回复
- 【求助/交流】关于反向PCR 和测序结果的拼接
已经有10人回复
芳芳在考研
银虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 121.1
- 散金: 60
- 帖子: 57
- 在线: 33.3小时
- 虫号: 2060392
- 注册: 2012-10-14
- 性别: MM
- 专业: 基因组学
2楼2013-11-06 21:54:43
3楼2013-11-07 08:26:28
芳芳在考研
银虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 121.1
- 散金: 60
- 帖子: 57
- 在线: 33.3小时
- 虫号: 2060392
- 注册: 2012-10-14
- 性别: MM
- 专业: 基因组学
4楼2013-11-07 08:47:29
5楼2013-11-07 11:11:06
芳芳在考研
银虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 121.1
- 散金: 60
- 帖子: 57
- 在线: 33.3小时
- 虫号: 2060392
- 注册: 2012-10-14
- 性别: MM
- 专业: 基因组学
6楼2013-11-07 13:49:01
7楼2013-11-07 17:19:45
8楼2013-11-08 09:35:33
20