| 查看: 1220 | 回复: 5 | ||
[求助]
有没有哪位大虾做过重组质粒在细胞膜表达？
|
|
前段时间刚做完质粒构建，迫不及待转染进细胞看一下，转染的是CHO细胞，转然后培养了大概48个小时，目的基因是在细胞膜表达的，转染后做了一个细胞免疫荧光，拍下图片发现除了细胞核没有染色外，细胞质细胞膜都染色了，而且细胞膜结构也看的不是很清楚，想问问各位大虾： 1、是我的质粒有问题导致细胞质染色还是转染质粒后就会这样？ 2、如何才能让在细胞膜表达的基因转染后只在CHO细胞膜表达？ PS:如果有这方面的文献求发来参考下哈。  1.jpg  2.jpg [ Last edited by sars37 on 2013-11-4 at 21:00 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有141人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有9人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 请教各位大虾，质粒转化，挑菌摇不起来的原因？如何解决？
已经有11人回复
2楼2013-11-05 09:22:37
沙门小rna
金虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 28 (小学生)
- 金币: 1117.7
- 散金: 5
- 红花: 6
- 沙发: 6
- 帖子: 644
- 在线: 76.7小时
- 虫号: 2012528
- 注册: 2012-09-19
- 专业: 病原细菌、细菌感染与宿主
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
sars37: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-11-05 20:09:51
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-11-06 00:55:16
感谢参与，应助指数 +1
sars37: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-11-05 20:09:51
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-11-06 00:55:16
|
呵呵。你这个问题太高深了。表达出蛋白就不是很容易了。而特定位置那和表达关系不大。是转运装配问题了。 涉及这里面通路的各种孔道蛋白和跨膜蛋白的转运。 。 无论是否异体还是原味表达。基因表达出的蛋白要想到达特定位置，得有负责转运他的特异性孔道蛋白，如果要出膜，那就需要负责定位和转运的跨膜蛋白，而且是特异性的。这和抗原抗体等结构匹配性是类同的。 原核的蛋白表达应该比真核简单。我们做的就是原核的表达，但是我们要得到特异位置表达的蛋白还真没发现这个技术。如果你是要得到膜上的蛋白。可以加点帮助转运的核苷酸或者标签试试。能帮助转运到膜上。这个东西搜搜就有很多因为做的东西不是细胞。我没把握是否是这样弄，但是原理是这样的。 |
3楼2013-11-05 12:54:28
4楼2013-11-05 16:38:18
沙门小rna
金虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 28 (小学生)
- 金币: 1117.7
- 散金: 5
- 红花: 6
- 沙发: 6
- 帖子: 644
- 在线: 76.7小时
- 虫号: 2012528
- 注册: 2012-09-19
- 专业: 病原细菌、细菌感染与宿主
5楼2013-11-05 17:19:26
沙门小rna
金虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 28 (小学生)
- 金币: 1117.7
- 散金: 5
- 红花: 6
- 沙发: 6
- 帖子: 644
- 在线: 76.7小时
- 虫号: 2012528
- 注册: 2012-09-19
- 专业: 病原细菌、细菌感染与宿主
6楼2013-11-05 21:10:13
100