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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » IC50 和细胞凋亡之间的浓度关系
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lingboweike

金虫 (小有名气)

[求助] IC50 和细胞凋亡之间的浓度关系

各位大侠，我是做有机合成的，现在需要些生物方面的知识，希望大家指导一二。。
  我做出了十几个化合物，需要测其抗肿瘤活性，和细胞凋亡实验。就是不确定，IC50和细胞凋亡实验的浓度关系，希望知道的虫友帮助解答。越详细越好，谢谢大家！
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1楼 2013-11-04 12:41:23
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lingboweike

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hl16010921 at 2013-11-04 14:17:38
1.IC50半数抑制浓度，此时一般指半数致死量，即存活50%（相对对照组）时的给药浓度。直接反映药物对细胞杀伤作用的强弱。
2.凋亡实验中，一般的细胞存活率要控制在50%左右，高于80%凋亡细胞过少，低于20%细胞损伤过 ...

那如果我要通过流式细胞仪测细胞凋亡，是不是要提供一个浓度梯度，这个梯度的范围怎么选择？
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3楼2013-11-04 14:38:24
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hl16010921

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
lingboweike: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-11-04 14:31:44
1.IC50半数抑制浓度，此时一般指半数致死量，即存活50%（相对对照组）时的给药浓度。直接反映药物对细胞杀伤作用的强弱。
2.凋亡实验中，一般的细胞存活率要控制在50%左右，高于80%凋亡细胞过少，低于20%细胞损伤过于严重（单纯的细胞杀伤实验结果可以是低于20%的）导致细胞数目和完整性较差。
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2楼2013-11-04 14:17:38
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hl16010921

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lingboweike at 2013-11-04 14:38:24
那如果我要通过流式细胞仪测细胞凋亡，是不是要提供一个浓度梯度，这个梯度的范围怎么选择？...

一般先用96孔板测定药物对细胞的毒性。用MTT法就行。此时要用不同浓度的药物处理细胞，看不同时间的存活率，挑选合适的给药剂量和时间。确定了给药剂量和时间后，放大到24孔板或细胞培养瓶（不同的流式细胞仪对细胞数目要求不同）做流式。因为凋亡早期和晚期指标不同，建议试一下不同时间药物处理。至于浓度梯度，要根据MTT的结果确定，一般会设高，中，低三个剂量或高低两个剂量，梯度要看药物的敏感性，不同梯度要有显著差异，并有明显的剂量依赖关系。可以先按文献上下个加一个数量级测MTT。再根据MTT结果确定IC50和给药浓度。
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4楼2013-11-04 15:05:02
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gaohy555

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
6楼2014-12-31 09:39:25
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