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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 液相分离度
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胖虎

金虫 (正式写手)

[交流] 液相分离度

液相摸索条件，展开剂乙腈-水25:75，分离度没达到要求，在1.36。然后我用24:76；23:77把峰往后拉了一段距离，分离度变成1.1了，比前一个要差，这是什么原因？ 我改怎么样提高分离度？ 柱子还是刚买不久。
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1楼 2013-10-29 17:52:17
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hukun100

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
胖虎: 金币+1 2013-10-30 09:50:17
中药2000: 金币+1, 谢谢 2013-10-30 17:38:14
中药2000: 回帖置顶 2013-10-31 17:07:04
楼主是在做分离么？
    要不试试把乙腈浓度提高一点再看看，我遇见过好几次这样的情况，就是在液相上（Agilent SB C-18柱），一定的流动相浓度范围内，乙腈的浓度越大，分离度反而越大，但超过了这个范围，分离度又降低！尽管楼主遇见的未必是这种特殊状况，但是也可以尝试一下改变流动相浓度，以观察变化趋势！
    另外，也可以更换流动相溶剂试试，比如用甲醇：水来洗脱！或是调节柱温箱温度，观察分离度是否有变化！或是在压力允许的情况下加快（或减慢）流动相流速！此外，恒冲分离度不好，可以尝试一下梯度洗脱！
    希望有所帮助！
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2楼2013-10-29 18:12:43
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suruiqin

版主 (知名作家)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
胖虎: 金币+1 2013-10-30 09:50:12
xiaoxiao270: 金币+1, 谢谢交流 2013-10-30 11:04:09
中药2000: 回帖置顶 2013-10-31 17:07:11
如果单纯的条件比例不能有效分离的话，那就试一下加点三乙胺什么的，应该会好些，
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3楼2013-10-29 18:20:49
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chenjiajiang198

至尊木虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
胖虎: 金币+1 2013-10-30 09:50:50
xiaoxiao270: 金币+1, 谢谢交流 2013-10-30 11:04:17
引用回帖:
3楼: Originally posted by suruiqin at 2013-10-29 18:20:49
如果单纯的条件比例不能有效分离的话，那就试一下加点三乙胺什么的，应该会好些，

反相条件还是加点酸吧，碱对柱子的损害比较大的吧
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4楼2013-10-29 22:54:50
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suruiqin

版主 (知名作家)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
胖虎: 金币+1 2013-10-30 09:50:54
xiaoxiao270: 金币+1, 谢谢交流 2013-10-30 11:04:26
引用回帖:
4楼: Originally posted by chenjiajiang198 at 2013-10-29 22:54:50
反相条件还是加点酸吧，碱对柱子的损害比较大的吧...

这个得看样品，跟柱子没有关系

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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5楼2013-10-30 01:13:54
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胖虎

金虫 (正式写手)
★
中药2000: 金币+1, 谢谢 2013-10-30 17:38:31
引用回帖:
2楼: Originally posted by hukun100 at 2013-10-29 18:12:43
楼主是在做分离么？
    要不试试把乙腈浓度提高一点再看看，我遇见过好几次这样的情况，就是在液相上（Agilent SB C-18柱），一定的流动相浓度范围内，乙腈的浓度越大，分离度反而越大，但超过了这个范围，分离度 ...

30%到22%都试过，24%的时候其实分的蛮好，24.578分钟出峰，前一个峰是22.160出峰。我发现液相软件积分跟我手动积分结果是不一样的。手动积分就达标了。图片不知道为什么传不上来。大侠觉得我手动积分可行吗？ 最后好生成报告吗
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6楼2013-10-30 13:25:56
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wangzunchen

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
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胖虎: 金币+1 2013-10-30 16:20:38
中药2000: 金币+1, 谢谢 2013-10-30 17:38:21
设置一下积分条件啊
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7楼2013-10-30 16:08:49
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胖虎

金虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by wangzunchen at 2013-10-30 16:08:49
设置一下积分条件啊

设置积分条件是什么意思？ 没有试过。 这个有什么作用。怎么设置啊
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8楼2013-10-30 16:21:31
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wangzunchen

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
中药2000: 金币+1, 谢谢 2013-10-31 17:08:03
就是设置一下积分斜率，峰宽什么的
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9楼2013-10-31 08:46:42
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胖虎

金虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by wangzunchen at 2013-10-31 08:46:42
就是设置一下积分斜率，峰宽什么的

哦，好的，谢谢啊，我试试
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10楼2013-10-31 09:05:01
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胖虎

金虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by wangzunchen at 2013-10-31 08:46:42
就是设置一下积分斜率，峰宽什么的

大侠，我想问问设置阈值跟峰宽有什么作用，这两个参数的意义是什么？求指教，菜鸟一个
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11楼2013-10-31 09:33:09
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wangzunchen

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
胖虎: 金币+2 2013-10-31 10:09:05
中药2000: 金币+1, 谢谢 2013-10-31 17:08:17
峰宽作用不大，主要是斜率影响积分宽度
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12楼2013-10-31 09:51:28
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胖虎

金虫 (正式写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by wangzunchen at 2013-10-31 09:51:28
峰宽作用不大，主要是斜率影响积分宽度

那这个斜率一般怎么设置呢？ 是在处理结果的时候设置吗？  以前一直没有注意到这个
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13楼2013-10-31 09:56:44
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胖虎

金虫 (正式写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by wangzunchen at 2013-10-31 09:51:28
峰宽作用不大，主要是斜率影响积分宽度

我刚刚设置了一下阈值，发现分离度达到要求了，可是导致峰面积有差距，这样处理合理吗？
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14楼2013-10-31 10:10:19
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wangzunchen

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
xiaoxiao270: 金币+1, 谢谢交流 2013-10-31 11:43:16
中药2000: 金币+1, 谢谢 2013-10-31 17:08:46
胖虎: 金币+2 2013-11-01 21:05:19
引用回帖:
14楼: Originally posted by 胖虎 at 2013-10-31 10:10:19
我刚刚设置了一下阈值，发现分离度达到要求了，可是导致峰面积有差距，这样处理合理吗？...

所有的峰面积都要变得吧，变化不大的，个人感觉影响不大的
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15楼2013-10-31 11:35:53
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wangzunchen

木虫 (正式写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 胖虎 at 2013-10-31 09:56:44
那这个斜率一般怎么设置呢？ 是在处理结果的时候设置吗？  以前一直没有注意到这个...

是啊，不知道你用的什么软件
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16楼2013-10-31 11:37:40
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胖虎

金虫 (正式写手)
引用回帖:
16楼: Originally posted by wangzunchen at 2013-10-31 11:37:40
是啊，不知道你用的什么软件...

Empower pro  这个是软件版本吗？我液相是waters2695配2996检测器
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17楼2013-10-31 13:56:10
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wangzunchen

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
17楼: Originally posted by 胖虎 at 2013-10-31 13:56:10
Empower pro  这个是软件版本吗？我液相是waters2695配2996检测器...

哦，我用的安捷伦的啊，软件不一样的
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18楼2013-10-31 15:51:52
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胖虎

金虫 (正式写手)
引用回帖:
18楼: Originally posted by wangzunchen at 2013-10-31 15:51:52
哦，我用的安捷伦的啊，软件不一样的...

o哦哦，那我摸索一下，谢谢哈
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19楼2013-11-01 09:39:46
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shooseal

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by 胖虎 at 2013-10-30 13:25:56
30%到22%都试过，24%的时候其实分的蛮好，24.578分钟出峰，前一个峰是22.160出峰。我发现液相软件积分跟我手动积分结果是不一样的。手动积分就达标了。图片不知道为什么传不上来。大侠觉得我手动积分可行吗？ 最后 ...

重新设置积分条件啊，肯定是你的积分参数没设好
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20楼2013-11-01 10:03:27
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胖虎

金虫 (正式写手)
引用回帖:
20楼: Originally posted by shooseal at 2013-11-01 10:03:27
重新设置积分条件啊，肯定是你的积分参数没设好...

我重新设置了阈值，之后样品积分蛮好的，但是标准品的积分用同样的阈值就积不到那么好，这个要不要紧？
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21楼2013-11-01 12:44:59
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shooseal

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
胖虎: 金币+2 2013-11-01 21:05:42
最好再调一调，影响也不算大
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22楼2013-11-01 15:25:16
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胖虎

金虫 (正式写手)
引用回帖:
22楼: Originally posted by shooseal at 2013-11-01 15:25:16
最好再调一调，影响也不算大

好的 谢谢
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23楼2013-11-01 21:04:29
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胖虎

金虫 (正式写手)
引用回帖:
15楼: Originally posted by wangzunchen at 2013-10-31 11:35:53
所有的峰面积都要变得吧，变化不大的，个人感觉影响不大的...

谢谢
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24楼2013-11-01 21:05:12
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顾莫柔

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我觉得还是从根源解决这个问题。流动相建议换成甲醇-水体系试试，毕竟分离度不好，不继续优化条件的话，以后方法验证同样很艰难~
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25楼2013-11-04 14:42:27
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胖虎

金虫 (正式写手)
引用回帖:
25楼: Originally posted by 顾莫柔 at 2013-11-04 14:42:27
我觉得还是从根源解决这个问题。流动相建议换成甲醇-水体系试试，毕竟分离度不好，不继续优化条件的话，以后方法验证同样很艰难~

峰分的蛮好的，两个峰明显是分的蛮开的。就是系统默认的积分条件不行，改了之后好多了
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26楼2013-11-05 14:16:59
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顾莫柔

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
26楼: Originally posted by 胖虎 at 2013-11-05 14:16:59
峰分的蛮好的，两个峰明显是分的蛮开的。就是系统默认的积分条件不行，改了之后好多了...

ok，解决了就好~我还担心是方法本身的问题导致分离度差~
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27楼2013-11-05 14:49:25
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