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胖虎

金虫 (正式写手)

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[交流] 液相分离度

液相摸索条件，展开剂乙腈-水25:75，分离度没达到要求，在1.36。然后我用24:76；23:77把峰往后拉了一段距离，分离度变成1.1了，比前一个要差，这是什么原因？我改怎么样提高分离度？柱子还是刚买不久。

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1楼 2013-10-29 17:52:17

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顾莫柔

金虫 (正式写手)

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★
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我觉得还是从根源解决这个问题。流动相建议换成甲醇-水体系试试，毕竟分离度不好，不继续优化条件的话，以后方法验证同样很艰难~

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25楼2013-11-04 14:42:27

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hukun100

木虫 (正式写手)

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★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
胖虎: 金币+1 2013-10-30 09:50:17
中药2000: 金币+1, 谢谢 2013-10-30 17:38:14
中药2000: 回帖置顶 2013-10-31 17:07:04

楼主是在做分离么？
要不试试把乙腈浓度提高一点再看看，我遇见过好几次这样的情况，就是在液相上（Agilent SB C-18柱），一定的流动相浓度范围内，乙腈的浓度越大，分离度反而越大，但超过了这个范围，分离度又降低！尽管楼主遇见的未必是这种特殊状况，但是也可以尝试一下改变流动相浓度，以观察变化趋势！
另外，也可以更换流动相溶剂试试，比如用甲醇：水来洗脱！或是调节柱温箱温度，观察分离度是否有变化！或是在压力允许的情况下加快（或减慢）流动相流速！此外，恒冲分离度不好，可以尝试一下梯度洗脱！
希望有所帮助！

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2楼2013-10-29 18:12:43

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