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ssqq0809

木虫 (小有名气)

[求助] Lowry 法测蛋白含量偏高是什么原因?

我测一个混合多肽样品的的蛋白含量,用Lowry法测定,乙液是买来的福林酚试剂,甲液是按照中国药典方法自己配置的,用BSA做标准曲线,波长650nm,按照中国药典的方法测定,标准曲线的R2可达0.9998,说明线性还是可以的。可是测样品的时候样品的蛋白含量却偏高,而且没有重复性,有时候偏高多有时候偏高的少,样品本身应该是没有问题的。现在找不到原因,甲液也重新配置了很多次了,福林酚试剂也买新的了,反应时间也是严格控制的,可还是偏高。
请问各位高手,这个偏高可能是什么原因导致的。另外,我把测过的样品放了个周末,本来周一看看时间对结果的影响,可是发现蓝色都消失了,测了吸光度也基本没有了,这个又是什么原因呢?
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